[發明專利]一種直接誘導黃花柳莖段成苗快繁的方法

有效

• 申請號: 202010713014.3
• 申請日: 2020-07-22
• 公開（公告）號: CN111758570B
• 公開（公告）日: 2022-05-13
• 發明（設計）人: 李翩翩;張國禹;黃桂云;邱利文;吳笛;張海波;吳錦華;楊蘭芳;胡梅香;馬曉波;汪磊;張俊;張定軍;望雄英;陳會員;李林寶;朱夢克;韓馥;李成道
• 申請（專利權）人: 中國長江三峽集團有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 宜昌市三峽專利事務所 42103
• 代理人: 成鋼

本發明是單配方誘導黃花柳莖成苗快繁發明技術，屬發明技術領域。主要技術要點是以黃花柳當年生莖段為外植體，接種于培養基Ms+KT0.4 mg·L^?1+IBA0.1 mg·L^?1+GA₃1.0 g·L^?1+蔗糖30g·L^?1+瓊脂6g·L^?1配方上，誘導叢生芽最好，再接種于MS+KT0.4mg·L^?1+IBA0.2mg·L^?1+GA₃1.0 g·L^?1+瓊脂6g·L^?1+蔗糖30g·L^?1配方上，增殖效果最佳；將增殖苗放入同激素配比KT:NAA(0.2:0.2)培養基中壯苗后接入1/2MS+IBA0.1mg·L^?1+NAA0.1mg·L^?1+20g·L^?1蔗糖+6g·L^?1瓊脂+0.5g·L^?1AC進行生根培養，最后移栽煉苗，有利于縮短組培周期，降低生產成本，適用于工廠化規模育苗。

技術領域

本發明涉及黃花柳莖段直接誘導叢生芽及生根快繁方法，屬于生物育種技術領域。

背景技術

目前，國內未發現黃花柳組培快繁報道，黃花柳為楊柳科植物，常見楊柳科植物繁殖放式多為扦插，扦插數量有限，扦插方式難以達到生產需求，因黃花柳體內含有生根阻礙物質，被譽為最難扦插植物，目前為止，并沒看到相關扦插報道。但黃花柳植物本身具有很高的觀賞價值及藥用價值，可祛風除濕、治筋骨痛，牙齦腫痛，惡瘡等疾病，也可供家具農具用，還可以提煉五種以上黃酮成分供于醫學。本文以黃花柳莖段為外植體進行快繁實驗，而植物微體快繁技術具有繁殖系數高、繁殖周期短、繁殖速度快的特點，對柳屬特別是扦插不易生根植物生物學研究具有重要的理論意義，且組培苗移栽不受季節的限制，有利于其規?；a。

發明內容

本發明采用黃花柳當年生帶芽莖段為材料，直接誘導叢生芽，從而建立黃花柳組培快繁體系。本發明先利用莖段直接誘導叢生芽，誘導率為95％，接著進行增殖培養，叢生芽增殖率為93.67％，且苗木健壯，然后同濃度(KT/IBA)激素轉接進行壯苗，最后經 1/2MS+IBA0.1mg·L^-1+NAA0.1mg·L^-1+20g·L^-1蔗糖+6 g·L^-1瓊脂+0.5g·L^-1AC生根，生根率可達到98.33a％，最后進行煉苗試驗。本發明不僅克服黃花柳繁殖系數低等缺點，而且縮短繁殖時間，降低生產成本，提高工作效率并適用于工廠規?；绲哪康?。

具體工藝步驟如下：

一種直接誘導黃花柳莖段成苗快繁的方法，包括如下步驟：

(1)外植體的采集與處理

將黃花柳帶芽莖段基部經GA₃浸泡、洗衣粉溶液浸泡、流水沖洗、酒精浸泡后經消毒得到外植體；

(2)培養條件

將消毒后的外植體接種到不含激素的MS空白培養基中，進行光照培養，得到無菌外植體；

(3)叢生芽誘導

將無菌外植體切段，轉接到添加有KT、IBA的混合激素及GA₃的MS培養基的誘導培養基中，單芽誘導培養15-30d，得到黃花柳不定芽；

(4)叢生芽增殖

將誘導的黃花柳不定芽切割轉管到添加有KT、IBA的混合激素及GA₃的MS培養基的增殖培養基上，叢生芽增殖培養10-25d，得到叢生芽；

(6)壯苗生根