[發明專利]一種食品中金黃色葡萄球菌定量檢測方法

在審

• 申請號: 202010711558.6
• 申請日: 2020-07-22
• 公開（公告）號: CN111961704A
• 公開（公告）日: 2020-11-20
• 發明（設計）人: 桓麗莎;張攀;王曉磊;常夢媛;王艷曉;阮潤田
• 申請（專利權）人: 鄭州中檢科測試技術有限公司
• 主分類號: C12Q1/14
• 分類號: C12Q1/14;C12Q1/06
• 代理公司: 鄭州立格知識產權代理有限公司 41126
• 代理人: 胡錦雯

1.一種食品中金黃色葡萄球菌定量檢測方法，其特征在于步驟如下：

步驟1：準備

1.1、按照生理鹽水的配制要求，稱取8.5g氯化鈉于1000mL三級水中，完全溶解后，高壓滅菌，冷卻，制備成生理鹽水備用；

1.2、按照Baird-Parker培養基基礎配制要求，稱取63.0g于950mL三級水中，加熱煮沸至完全溶解，高壓滅菌，46℃保溫，制備Baird-Parker培養基液，按比例取亞碲酸鉀卵黃增菌液加入到Baird-Parker培養基液中，混勻，備用；

步驟2：制樣

2.1、制樣，無菌稱取25g待測樣品置于盛有225mL如步驟1.1制備的生理鹽水的無菌均質袋內，用拍擊式均質器拍打1min-5min，制成1:10的樣品勻液；

2.2、稀釋，將樣品均液用如步驟1.1制備的生理鹽水10倍系列稀釋，選擇2-3個適宜的連續稀釋度樣品；

步驟3：培養

3.1、將步驟2.2選擇的每個稀釋度樣品分別吸取1mL樣品勻液至培養皿中，每個稀釋度樣品做2個，然后每個培養皿中加入15-20mL添加了亞碲酸鉀卵黃增菌液的Baird-Parker培養基液，混勻，得到培養平板；

3.2、待培養平板凝固后倒置放入培養箱中，恒溫36℃，培養48h；

步驟4：計數

4.1、計數可疑菌落；

4.2、將可疑菌落通過血漿凝固酶試驗進行確證鑒定。

2.根據權利要求1所述的一種食品中金黃色葡萄球菌定量檢測方法，其特征在于：所述步驟1中的高壓滅菌使用型號為GI180TW立式自動壓力蒸汽滅菌器。

3.根據權利要求2所述的一種食品中金黃色葡萄球菌定量檢測方法，其特征在于：所述步驟1中高壓滅菌的溫度為121℃，保持時間為15min。

4.根據權利要求1所述的一種食品中金黃色葡萄球菌定量檢測方法，其特征在于：所述步驟1.2中的亞碲酸鉀卵黃增菌液與Baird-Parker培養基液的比例（容積比）為1:20。

5.根據權利要求1所述的一種食品中金黃色葡萄球菌定量檢測方法，其特征在于：所述步驟3.2中，如果培養平板中的樣品均液不被吸收，則將培養平板放置培養箱中，恒溫36℃，培養1小時，等樣品勻液吸收后翻轉培養平板進行培養。

6.根據權利要求1所述的一種食品中金黃色葡萄球菌定量檢測方法，其特征在于：所述吸取稀釋度樣品的工具為移液槍。