[發明專利]一種頭孢菌素C的發酵方法

在審

• 申請號: 202010705540.5
• 申請日: 2020-07-21
• 公開（公告）號: CN111876462A
• 公開（公告）日: 2020-11-03
• 發明（設計）人: 黨建寧;王強;寇韓濤;楊麗麗;趙佳美;何彬
• 申請（專利權）人: 伊犁川寧生物技術有限公司
• 主分類號: C12P35/06
• 分類號: C12P35/06;C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 北京慕達星云知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 11465
• 代理人: 趙徐平

本發明公開了一種頭孢菌素C的發酵方法，具體步驟包括：采用頂頭孢霉菌依次制備一級種子、二級種子、三級種子，然后將得到的三級種子進行發酵的同時在培養基中流加玉米漿，制得發酵液，然后將發酵液分離純化，制得到頭孢菌素C。本發明采用的玉米漿為濕磨法生產玉米淀粉的副產物，玉米漿中含有大量的亞硫酸、多肽、多糖、蛋白質及多種氨基酸如精氨酸、纈氨酸、組氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸以及半胱氨酸等，這些成分均是發酵頭孢菌素C的前體成分，在發酵過程中流加玉米漿能為菌體生長代謝提供全面的營養成分，從而達到提高頭孢菌素C的發酵水平和頭孢菌素C的發酵產量、降低發酵成本，具有優秀的產業化前景。

技術領域

本發明涉及微生物發酵領域，具體涉及一種頭孢菌素C的發酵方法。

背景技術

頭孢菌素C由頂頭孢霉(Cephalosporiumacremonuim)產生，是頂頭孢霉菌的初級代謝在特定條件下的繼續與發展的產物，是繼青霉素之后又一重要的β-內酰胺類抗生素。目前提高頭孢菌素C生產水平的主要途徑為：一是改變菌種原有性能，進行誘變篩選或基因工程技術獲得高產菌種，二是優化發酵工藝。

目前國外頭孢菌素C發酵水平明顯高于國內，因此，提供一種新的發酵頭孢菌素C的發酵方法以提高發酵水平，從而提高頭孢菌素C產量、降低發酵成本是本領域技術人員亟需解決的技術問題。

發明內容

有鑒于此，本發明提供了一種頭孢菌素C的發酵方法；

為了實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

頭孢菌素C的發酵方法，包括以下步驟：

(1)制備一級種子

取頂頭孢霉菌置于茄子瓶斜面，制備質量體積比為20-25％的菌懸液，按照1％-2％的接種量接種至一級種子培養基中，溫度為27-29℃的條件下培養50h，得到一級種子；

(2)制備二級種子

取步驟(1)所得一級種子，按照8％-10％的接種量接種于二級種子培養基中，在PH為6.5-7.4、溫度為27-29℃的條件下培養45-50h，得到二級種子；

(3)制備三級種子

取步驟(2)所得二級種子，按照8％-10％的接種量接種于三級種子培養基中，在PH為6.5-7.4、溫度為27-29℃的條件下培養45-50h，得到三級種子；

(4)發酵

取步驟(3)所得三級種子，按照25-33％的接種量接種至發酵培養基中培養，在發酵過程發酵培養40-100h后開始流加玉米漿，發酵130h后即得發酵液；

(5)將步驟(4)依次經過陶瓷膜過濾發酵液流量控制在15-30m³/h、納濾濃縮流量控制在60-80m³/h、樹脂吸附流量控制在50-80m³/h、解析分離純化流量控制在30-60m³/h，即得所述頭孢菌素C。

與現有技術相比本發明的有益技術效果在于：本發明采用的玉米漿為濕磨法生產玉米淀粉的副產物，玉米漿中含有大量的亞硫酸、多肽、多糖、蛋白質及多種氨基酸如精氨酸、纈氨酸、組氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸以及半胱氨酸等，這些成分均是發酵頭孢菌素C的前體成分，在發酵過程中流加玉米漿能為菌體生長代謝提供全面的營養成分，從而達到提高頭孢菌素C的發酵水平和頭孢菌素C的發酵產量、降低發酵成本，具有優秀的產業化前景。

進一步，上述步驟(1)中，頂頭孢霉菌的保藏編號為ATCC36225。