[發明專利]一種多組學分析的樣品前處理方法及其應用

有效

• 申請號: 202010701024.5
• 申請日: 2020-07-20
• 公開（公告）號: CN111766325B
• 公開（公告）日: 2022-09-20
• 發明（設計）人: 田瑞軍;高偉娜;張巧云;蘇怡然
• 申請（專利權）人: 南方科技大學
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/08;G01N30/88
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 潘登

本發明提供一種多組學分析的樣品前處理方法及其應用，所述樣品前處理方法包括如下步驟：(1)將待測樣品加到樣品前處理裝置上離心上樣，得到上樣后的樣品；(2)將樣品洗脫，得到洗脫液和洗脫后樣品；收集洗脫液，得到代謝組學分析樣品；(3)將洗脫后樣品進行酶解并轉移至固相萃取膜上，洗脫，收集洗脫液，得到蛋白質組學分析樣品。所述樣品前處理方法能夠集成化地進行單滴血液的采集、干燥樣品的運輸、待測物的富集以及多組學分析樣品的制備，進而采用同一液相質譜分析設備對來自單滴血漿的多組學樣品進行質譜分析，從樣本前處理到獲得分析結果的流程可控制在6小時內，實現快捷、高靈敏度和高準確性的分析檢測。

技術領域

本發明屬于生物分析檢測技術領域，具體涉及一種多組學分析的樣品前處理方法及其應用。

背景技術

質譜法(MS)是一種靈敏度高、特異性強、分析速度快的譜學分析方法，質譜法在一次分析中可以獲得豐富的結構信息，將質譜法和不同的分離技術相結合是分析科學方法中的一項突破性進展，尤其是液相色譜與質譜的聯用，已成為一種分離和鑒定復雜混合物組成及結構的可靠手段，在生物醫藥、公共安全以及環境監測等多個領域有著廣泛的應用。在生物醫藥領域，基于質譜技術的組學研究方法為疾病的預測和診斷、標志物的發現以及機理的研究等提供了強有力的工具。

在生物技術領域，組學研究方法包括蛋白質組學、基因組學、代謝組學、糖組學和脂質組學等，上述研究可以提高人們對生命活動原理的認識，進而促進新的醫療方法和藥物的開發。近年來，隨著組學研究在生物技術領域的發展和逐漸成熟，單從一個層次的生物分子(例如核酸、蛋白質、小分子代謝物等)的變化來分析或找尋生物標志物的策略已經很難滿足生物學越來越高的研究期望。從多分子層次出發，系統研究蛋白質和代謝產物等生物分子之間的相互作用和系統機制，為疾病的研究和治療提供了新的方向。

血液由于其易于獲取的特性，是目前應用于疾病診斷和監測的最主要樣本源之一。在血液中的各種分析物中，蛋白質和代謝物是生物標志物最主要的來源。通過基于抗體的測定方式，該兩類生物標志物的檢測已廣泛用于臨床診斷。自1990年初以來，基于質譜(MS)的代謝組學已廣泛用于血漿生物標志物的發現和常規診斷，尤其是針對新生兒篩查。自從基于蛋白質芯片(SELDI-TOF)技術的蛋白質組學成功應用于早期卵巢癌生物標志物OVA1的發現以來，臨床蛋白質組學系統規模的對生物標志物的探索已引起越來越多的關注。為了更好的全面體現生物樣品的分子基礎和表型關系，越來越多的研究聚焦在分析同一血漿樣品中的蛋白質組和代謝組學。而通常情況下，血漿樣品通常分為兩部分，分別通過不同的樣品制備程序和LC-MS設置對蛋白質和代謝物進行提取和分析。