[發(fā)明專利]一種多組學分析的樣品前處理方法及其應用

有效

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• 申請日: 2020-07-20
• 公開（公告）號: CN111766325B
• 公開（公告）日: 2022-09-20
• 發(fā)明（設計）人: 田瑞軍;高偉娜;張巧云;蘇怡然
• 申請（專利權(quán)）人: 南方科技大學
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/08;G01N30/88
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 潘登

1.一種多組學分析的樣品前處理方法，其特征在于，所述多組學分析包括蛋白質(zhì)組學分析和代謝組學分析，所述樣品前處理方法包括如下步驟：

(1)將待測樣品加入到樣品前處理裝置上，離心進行上樣，得到上樣后的樣品；所述樣品前處理裝置包括移液槍槍頭，以及自下而上依次填充于所述移液槍槍頭中的固相萃取膜、C18樹脂和離子交換樹脂；

(2)將步驟(1)得到的樣品用有機溶劑進行洗脫，得到洗脫液和洗脫后樣品；收集所述洗脫液，得到代謝組學分析樣品；

(3)將步驟(2)得到的洗脫后樣品進行酶解，得到的酶解多肽轉(zhuǎn)移至固相萃取膜上，洗脫，收集洗脫液，得到蛋白質(zhì)組學分析樣品；

步驟(2)所述有機溶劑為異丙醇和/或乙腈；

所述固相萃取膜為C18膜；

所述離子交換樹脂為強陽離子交換樹脂和強陰離子交換樹脂的混合物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的樣品前處理方法，其特征在于，所述移液槍槍頭的規(guī)格為200μL。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的樣品前處理方法，其特征在于，以所述移液槍槍頭的規(guī)格為200μL計，所述C18樹脂的填充量為0.25～1mg。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的樣品前處理方法，其特征在于，以所述移液槍槍頭的規(guī)格為200μL計，所述C18樹脂的填充量為0.5mg。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的樣品前處理方法，其特征在于，所述固相萃取膜的填充量為1～3個。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的樣品前處理方法，其特征在于，以所述移液槍槍頭的規(guī)格為200μL計，所述離子交換樹脂的填充量為1～3mg。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的樣品前處理方法，其特征在于，以所述移液槍槍頭的規(guī)格為200μL計，所述離子交換樹脂的填充量為2mg。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的樣品前處理方法，其特征在于，所述強陽離子交換樹脂和強陰離子交換樹脂的質(zhì)量比為(10～1):(1～10)。

9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的樣品前處理方法，其特征在于，所述強陽離子交換樹脂和強陰離子交換樹脂的質(zhì)量比為(5～1):(1～3)。

10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的樣品前處理方法，其特征在于，步驟(1)所述離心的次數(shù)為1～3次。

11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的樣品前處理方法，其特征在于，步驟(1)所述離心的次數(shù)為2次。

12.根據(jù)權(quán)利要求1所述的樣品前處理方法，其特征在于，步驟(1)所述待測樣品為血漿樣品。

13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的樣品前處理方法，其特征在于，步驟(1)所述待測樣品為稀釋的血漿樣品。

14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的樣品前處理方法，其特征在于，所述稀釋的方法為：將1μL血漿用稀釋劑稀釋至50～70μL，得到所述待測樣品。

15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的樣品前處理方法，其特征在于，所述稀釋劑包括碳酸氫銨溶液。

16.根據(jù)權(quán)利要求1所述的樣品前處理方法，其特征在于，步驟(1)所述待測樣品的加入量為20～80μL。

17.根據(jù)權(quán)利要求16所述的樣品前處理方法，其特征在于，步驟(1)所述待測樣品的加入量為50μL。

18.根據(jù)權(quán)利要求1所述的樣品前處理方法，其特征在于，步驟(1)所述樣品前處理裝置為經(jīng)過預處理的樣品前處理裝置。