[發明專利]氯硝西泮的檢測方法

有效

• 申請號: 202010700193.7
• 申請日: 2020-07-20
• 公開（公告）號: CN111830177B
• 公開（公告）日: 2022-07-12
• 發明（設計）人: 賈永娟;楊緩緩;倪君君
• 申請（專利權）人: 北京和合醫學診斷技術股份有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 濟南信達專利事務所有限公司 37100
• 代理人: 李世喆

本發明提供了氯硝西泮的檢測方法，包括：制備具有氯硝西泮和內標物的至少三種濃度的標準溶液，標準溶液中的內標物的量相同；利用液質聯用儀在檢測條件下檢測每一種標準溶液，獲得標準溶液對應的第一檢測結果；根據各個第一檢測結果、標準溶液中氯硝西泮的濃度和內標物的濃度，擬合氯硝西泮的標準曲線方程；取待處理樣品離心后的第一上清液；向第一上清液內加入內標物，渦旋混勻，順次加入萃取劑，對第一上清液進行萃取，得到待測樣品；利用液質聯用儀在檢測條件下檢測待測樣品，獲得待測樣品的第二檢測結果；基于標準曲線方程和第二檢測結果，得到待測樣品中氯硝西泮的濃度。本方案能夠縮短樣品檢測時間。

技術領域

本發明涉及生物檢測技術領域，特別涉及氯硝西泮的檢測方法。

背景技術

氯硝西泮為一種苯二氮卓類衍生物，是一種廣譜抗癲癇藥，多用于治療各型癲癇和驚厥，治療焦慮狀態和失眠，對舞蹈癥及各類神經痛也有一定的療效。

目前，檢測樣品中氯硝西泮含量通常采用的方法為高效液相色譜法。而才用該方法檢測通常需要對待測樣品進行較復雜的前處理，耗費時間較多，從而導致樣品檢測時間較長。

發明內容

本發明提供了氯硝西泮的檢測方法，能夠縮短樣品檢測時間。

為了解決上述問題，本發明實施例提供了氯硝西泮的檢測方法，包括：

制備至少三種濃度的標準溶液，其中，所述標準溶液為具有氯硝西泮和內標物的溶液，所述至少三種濃度的標準溶液中的內標物的量相同；

利用液質聯用儀在預設的檢測條件下分別檢測每一種所述標準溶液，獲得每一種所述標準溶液對應的第一檢測結果；

根據各個所述第一檢測結果、所述標準溶液中氯硝西泮的濃度和內標物的濃度，擬合氯硝西泮的標準曲線方程；

對待處理樣品進行離心處理，取離心后的第一上清液；

向所述第一上清液內加入內標物，渦旋混勻，順次加入萃取劑，對所述第一上清液進行萃取，得到待測樣品；

利用液質聯用儀在所述檢測條件下檢測所述待測樣品，獲得所述待測樣品的第二檢測結果；

基于所述標準曲線方程和所述第二檢測結果，得到所述待測樣品中氯硝西泮的濃度。

優選地，為了更準確地檢測出待測樣品中氯硝西泮的濃度，標準溶液和待測樣品中的內標物均為硝西泮。

具體地，系列濃度的標準溶液制備方式如下：

(1)標準儲備液的配制

精確稱取氯硝西泮標準品置于容量瓶中，用甲醇水溶液作為稀釋液進行溶解，并定容至容量瓶標線，得到標準儲備液，并在-80℃條件下保存，有效期為一年。

(2)標準工作液的配制

取適量步驟(1)中標準儲備液，用稀釋液進行稀釋混合，得到含有50-2000ng/mL氯硝西泮的系列標曲混合中間液作為標準工作液，并在-80℃條件下保存，有效期為3個月。

(3)內標儲備液的配制

取內標物硝西泮標準品置于容量瓶中，用稀釋液進行溶解，并定容至容量瓶的標線，得到內標儲備液，并在-80℃條件下保存，有效期為1年。

(4)內標工作液的配制

取步驟(3)中內標儲備液，用稀釋液進行稀釋，得到含硝西泮的內標工作液，并在-80℃保存，有效期1年。

(5)標準溶液的標定