[發明專利]氯硝西泮的檢測方法

有效

• 申請號: 202010700193.7
• 申請日: 2020-07-20
• 公開（公告）號: CN111830177B
• 公開（公告）日: 2022-07-12
• 發明（設計）人: 賈永娟;楊緩緩;倪君君
• 申請（專利權）人: 北京和合醫學診斷技術股份有限公司
• 主分類號: G01N30/06
• 分類號: G01N30/06;G01N30/88
• 代理公司: 濟南信達專利事務所有限公司 37100
• 代理人: 李世喆

1.氯硝西泮的檢測方法，其特征在于，包括：

制備至少三種濃度的標準溶液，其中，所述標準溶液為具有氯硝西泮和內標物的溶液，所述至少三種濃度的標準溶液中的內標物的量相同；

利用液質聯用儀在預設的檢測條件下分別檢測每一種所述標準溶液，獲得每一種所述標準溶液對應的第一檢測結果；

根據各個所述第一檢測結果、所述標準溶液中氯硝西泮的濃度和內標物的濃度，擬合氯硝西泮的標準曲線方程；

對待處理樣品進行離心處理，取離心后的第一上清液；向所述第一上清液內加入內標物，渦旋混勻，順次加入萃取劑，對所述第一上清液進行萃取，得到待測樣品，包括：

向所述第一上清液內加入內標物，在1500-2500 rpm的轉速下渦旋混合0.5-1min；

順序加入萃取劑，在1500-2500 rpm的轉速下渦旋混合3-10min，并在10000-15000rpm的轉速下高速離心8-15min，移取離心后的第二上清液；

利用氮氣將移取的所述第二上清液吹干，順次加入復溶液，在1500-2500 rpm的轉速下渦旋混合1-3min，取第三上清液作為待測樣品；

所述復溶液包括：70-85%的甲醇水溶液；

所述第二上清液與所述復溶液的體積比為：1:2.5-1:10；

利用液質聯用儀在所述檢測條件下檢測所述待測樣品，獲得所述待測樣品的第二檢測結果；

基于所述標準曲線方程和所述第二檢測結果，得到所述待測樣品中氯硝西泮的濃度；

所述檢測條件中的液相條件，包括：

長度為150mm、內徑為2.1mm以及填料粒徑為5μm的Waters Atlantis dC18色譜柱；

洗脫流動相采用等度洗脫，所述等度洗脫含有0.01%-0.3%甲酸的水溶液和含有0.01%-0.3%甲酸的甲醇的體積比為：15:85；

所述萃取劑包括：乙酸乙酯。

2.根據權利要求1所述的氯硝西泮的檢測方法，其特征在于，

所述檢測條件中的質譜條件，包括：

采用ESI離子源，正離子掃描模式和反應監測模式；加熱氣流速：12 L/min；加熱氣溫度：350℃；霧化電壓：40 psi；毛細管電壓：4500 psi。

3.根據權利要求1所述的氯硝西泮的檢測方法，其特征在于，

所述標準曲線方程的兩個變量分別為：所述標準溶液中氯硝西泮的色譜峰面積與內標物的色譜峰面積的比值，以及所述標準溶液中氯硝西泮的濃度與內標物的濃度的比值。

4.根據權利要求1至3中任一所述的氯硝西泮的檢測方法，其特征在于，

所述內標物為硝西泮。