[發明專利]多殺菌素半抗原、人工抗原和抗體及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202010697076.X
• 申請日: 2020-07-20
• 公開（公告）號: CN111875652A
• 公開（公告）日: 2020-11-03
• 發明（設計）人: 萬宇平;王兆芹;馮月君;王琳琛;徐念琴;張坤;楊春艷;張彩麗
• 申請（專利權）人: 北京勤邦生物技術有限公司;北京望爾生物技術有限公司
• 主分類號: C07H17/08
• 分類號: C07H17/08;C07H1/00;C07H1/06;C07K14/765;C07K14/77;C07K14/795;C07K1/107;C07K16/44;G01N33/53
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種多殺菌素半抗原，其特征在于，其具有如下結構式：

2.如權利要求1所述的多殺菌素半抗原的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

1)在過氧化物作用下，多殺菌素與溴化氫發生加成反應，得到溴代多殺菌素，所述溴代多殺菌素具有結構式

2)在堿性條件下，溴代多殺菌素與氨基丁酸發生親核取代反應，得到多殺菌素半抗原。

3.如權利要求2所述的多殺菌素半抗原的制備方法，其特征在于，所述步驟1)中，所述過氧化物為間氯過氧苯甲酸；

所述反應在溶劑中進行，所述溶劑為無水四氯化碳；

所述反應條件為：將干燥的溴化氫氣體通入含有間氯過氧苯甲酸的無水四氯化碳中，攪拌1h，再滴加含有多殺菌素的無水四氯化碳，室溫繼續攪拌2h；

所述步驟1)反應結束后，還包括對反應體系進行后處理的步驟，具體如下：在反應體系中加入水，充分震蕩，靜置，分去水相，有機相蒸干得到溴代多殺菌素。

4.如權利要求2所述的多殺菌素半抗原的制備方法，其特征在于，所述步驟2)中，所述堿性條件由無水碳酸鉀提供，所述溴代多殺菌素、氨基丁酸的物質的量之比為1∶(5～6)；

所述反應在溶劑中進行，所述溶劑為乙腈；

所述反應需要催化劑的參與，所述催化劑為無水碘化鈉；

所述反應條件為：油浴加熱回流反應4h；

所述步驟2)反應結束后，還包括對反應體系進行后處理的步驟，具體如下：在反應體系中加入水，加乙酸乙酯萃取3次，合并有機相，蒸干，用硅膠柱純化，然后用二氯甲烷和甲醇體積比為10:1的混合溶劑洗脫分離獲得多殺菌素半抗原。

5.一種多殺菌素人工抗原，其特征在于，其是載體蛋白和權利要求1所述的多殺菌素半抗原偶聯得到的偶聯物。

6.如權利要求5所述的多殺菌素人工抗原，其特征在于，所述載體蛋白為牛血清白蛋白、卵清蛋白、人血清白蛋白或血藍蛋白。

7.如權利要求5或6所述的多殺菌素人工抗原的制備方法，其特征在于，采用活潑酯法將載體蛋白偶聯于權利要求1所述多殺菌素半抗原的羧基上。

8.一種多殺菌素抗體，其特征在于，它是由權利要求5所述的多殺菌素人工抗原經動物免疫得到，其能與多殺菌素發生特異性免疫反應。

9.一種權利要求8所述的多殺菌素抗體在檢測多殺菌素殘留中的應用。