[發明專利]黑色素前體物多巴醌的制備方法及應用

在審

• 申請號: 202010695664.X
• 申請日: 2020-07-20
• 公開（公告）號: CN111826406A
• 公開（公告）日: 2020-10-27
• 發明（設計）人: 張天;杜成強
• 申請（專利權）人: 西安幸福未來化妝品有限公司
• 主分類號: C12P13/04
• 分類號: C12P13/04;A61K8/44;A61Q5/10
• 代理公司: 西安新思維專利商標事務所有限公司 61114
• 代理人: 李罡

1.一種黑色素前體物多巴醌的制備方法，其特征在于：

以黧豆提取物左旋多巴為主要生色活性物質，使用土豆皮提取的酪氨酸酶在生物工藝催化反應下生成黑色素前體多巴醌。

2.根據權利要求1所述的一種黑色素前體物多巴醌的制備方法，其特征在于：

具體步驟如下：

步驟一、黧豆提取物的制備：

將藜豆粉碎，用質量分數30%乙醇與0.1%乙酸的混合液常溫提取，過濾，得提取液；將提取液減壓濃縮，析出結晶，靜置過夜，過濾，得左旋多巴粗品；粗品溶解過濾，濾液加維生素C， 調節pH為3.5，析出結晶，靜置4h，過濾；濾餅洗滌干燥，得黧豆提取物；

步驟二、酪氨酸粗酶凍干粉的制備：

馬鈴薯塊莖過夜，清水解凍，得碎皮屑，加入聚乙烯吡略烷酮和磷酸緩沖液勻漿，過濾，緩慢加入硫酸銨粉末，離心；取上清液繼續加入硫酸銨，離心；沉淀真空冷凍干燥，得到酪氨酸粗酶凍干粉；

步驟三、利用步驟一和二制得的提取物進行生物催化反應：

配置質量分數為10%黧豆提取物溶液，加入生物反應器中，將溫度控制在35℃，按照黧豆提取物溶液體積的1/10的比例，加入質量分數30%酪氨酸粗酶凍干粉溶液，進行生物轉化反應，定時取樣檢測，當300nm的吸光度大于2.0并且475nm的吸光度大于0.5時，終止生物轉化反應，得到黑色素前體物粗品；

步驟四、粗品純化：

對步驟三所得的黑色素前體物粗品進行離心去蛋白、活性炭吸附去黑色素顆粒、乙酸乙酯萃取、旋轉蒸發除溶劑純化處理，得到黑色素前體物多巴醌。

3.根據權利要求1所述的一種黑色素前體物多巴醌的制備方法，其特征在于：

步驟一中，所述靜置溫度為0-10℃；所述干燥溫度為60-70℃。

4.如權利要求1-3所述制備方法制得的黑色素前體物多巴醌在染發方面的應用。