[發明專利]柯薩奇病毒A7的病毒樣顆粒及其制備方法和應用有效
| 申請號: | 202010690365.7 | 申請日: | 2020-07-17 |
| 公開(公告)號: | CN112011572B | 公開(公告)日: | 2022-05-06 |
| 發明(設計)人: | 朱朗;李雅靜;陰彥輝;馬銘江;呂哲;高強 | 申請(專利權)人: | 北京科興生物制品有限公司;北京科興中維生物技術有限公司 |
| 主分類號: | C12N15/866 | 分類號: | C12N15/866;C07K14/085;G01N33/569;A61K39/125;A61P31/14 |
| 代理公司: | 北京睿陽聯合知識產權代理有限公司 11758 | 代理人: | 王瑩;張穎 |
| 地址: | 100085 *** | 國省代碼: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 柯薩奇 病毒 a7 顆粒 及其 制備 方法 應用 | ||
1.重組桿狀病毒表達載體,其特征在于,所述表達載體具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列和SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。
2.根據權利要求1所述的表達載體,其特征在于,所述表達載體進一步包含AcMNPV p10啟動子和/或polyhedrin啟動子。
3.柯薩奇病毒A7的病毒樣顆粒的表達系統,其特征在于,所述表達系統包含權利要求1或2所述的表達載體,所述表達系統為昆蟲細胞。
4.根據權利要求3所述的表達系統,其特征在于,所述昆蟲細胞是Sf9昆蟲細胞。
5.具有免疫原性的柯薩奇病毒A7的病毒樣顆粒,其特征在于,所述病毒樣顆粒具有SEQID NO.3所示的氨基酸序列的P1蛋白和SEQ ID NO.4所示的氨基酸序列的3CD蛋白;
所述柯薩奇病毒A7的病毒樣顆粒通過如下步驟制備:
(1)構建包含SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列和SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列的表達載體;
(2)利用所述表達載體轉化具有桿狀病毒骨架的大腸桿菌,獲得桿粒;
(3)用步驟(2)獲得的桿粒感染昆蟲細胞進行表達,得到所述柯薩奇病毒A7的病毒樣顆粒。
6.制備權利要求5所述的柯薩奇病毒A7的病毒樣顆粒的方法,其特征在于,所述方法包括如下步驟:
(1)構建包含SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列和SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列的表達載體;
(2)利用所述表達載體轉化具有桿狀病毒骨架的大腸桿菌,獲得桿粒;
(3)用步驟(2)獲得的桿粒感染昆蟲細胞進行表達,得到所述柯薩奇病毒A7的病毒樣顆粒。
7.根據權利要求6所述的方法,其特征在于,所述表達載體進一步包含AcMNPV p10啟動子和/或polyhedrin啟動子。
8.權利要求5所述的病毒樣顆?;驒嗬?或7所述的制備方法制備的病毒樣顆粒在制備預防手足口病的病毒感染的疫苗中的應用。
9.權利要求5所述的病毒樣顆?;驒嗬?或7所述的制備方法制備的病毒樣顆粒作為抗原在制備手足口病的病毒感染免疫檢測試劑盒中的應用。
10.預防手足口病的病毒感染的疫苗,其特征在于,所述疫苗通過權利要求5所述的病毒樣顆?;驒嗬?或7所述的制備方法制備的病毒樣顆粒制備。
11.手足口病的病毒感染免疫檢測試劑盒,其特征在于,所述試劑盒通過權利要求5所述的病毒樣顆粒或權利要求6或7所述的制備方法制備的病毒樣顆粒作為抗原制備。
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