[發明專利]同時檢測鹽酸法舒地爾中基因毒性雜質5-異喹啉磺酸甲酯和5-異喹啉磺酸乙酯的方法

有效

• 申請號: 202010690141.6
• 申請日: 2020-07-17
• 公開（公告）號: CN111624276B
• 公開（公告）日: 2021-04-09
• 發明（設計）人: 劉宇晶;鄭柏松;孫麗;王金泉;萬忠民;諶宗永
• 申請（專利權）人: 北京陽光諾和藥物研究股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/86
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 王春霞

本發明公開了一種同時檢測鹽酸法舒地爾中基因毒性雜質5?異喹啉磺酸甲酯和5?異喹啉磺酸乙酯的方法。所述方法包括如下步驟：采用HPLC檢測；HPLC檢測的條件為：固定相為十八烷基硅烷鍵合硅膠；流動相A為體積分數為0.5%的三乙胺水溶液，采用磷酸調pH至7.0；流動相B為甲醇；梯度洗脫。在本發明檢測條件下，兩種雜質和鹽酸法舒地爾能有效分離，且兩種雜質的出峰良好，響應值較高。使用本發明方法可以大大提高檢測的靈敏度，設備儀器均為普通，檢測成本低廉，操作極為簡便，大大節約了檢測成本和檢測時間。

技術領域

本發明涉及一種鹽酸法舒地爾中基因毒性雜質的檢測方法，屬于藥物分析技術領域。

背景技術

基因毒性雜質是指化合物本身直接或間接損傷細胞DNA，產生基因突變或體內誘變，具有致癌可能或者傾向。潛在的基因毒性的雜質從結構上看類似基因毒性雜質，有警示性，但未經試驗證明的黃曲霉素類、亞硝胺化合物、甲基磺酸酯等化合物均為常見的基因毒性雜質。近年來各國的法規和機構如ICH、FDA、EMA等都對基因毒性雜質有了更明確的要求，越來越多的醫藥企業在新藥研發過程中就著重關注基因毒性雜質的控制和檢測。

鹽酸法舒地爾潛在的基因毒性雜質5-異喹啉磺酸甲酯和5-異喹啉磺酸乙酯是在合成中間體時5-異喹啉磺酰氯與鹽酸法舒地爾粗品制備的溶劑甲醇(甲醇中可能含有少量乙醇)反應生成的磺酸酯類化合物，在生產過程中可能傳遞到成品中。因此，為了更好地控制鹽酸法舒地爾潛的基因毒性雜質，需要選取靈敏度高、簡便快捷的方法進行檢測，以保證產品的安全性和可靠性。

發明內容

本發明的目的是提供一種鹽酸法舒地爾中基因毒性雜質的檢測方法，在本發明檢測條件下，兩種雜質和鹽酸法舒地爾能有效分離，且兩種雜質的出峰良好，響應值較高。

本發明方法所涉及的基因毒性雜質為5-異喹啉磺酸甲酯和5-異喹啉磺酸乙酯，其中，5-異喹啉磺酸甲酯的結構式如式Ⅰ所示，分子式為C₁₀H₉NO₃S，分子量為223.25；5-異喹啉磺酸乙酯的結構式如式Ⅱ所示，分子式為C₁₁H₁₁NO₃S，分子量為237.28。

本發明采用HPLC檢測鹽酸法舒地爾中的兩種基因毒性雜質。

本發明方法中，HPLC檢測的條件如下：

固定相：固定相為十八烷基硅烷鍵合硅膠；

色譜柱為InertSustain AQ-C18，規格為250×4.6mm，5μm；

檢測波長：238nm；

流動相A：體積分數為0.5％的三乙胺水溶液，采用磷酸調pH至7.0；

流動相B：甲醇；

洗脫方式：梯度洗脫；

所述洗脫梯度的程序為：

0～18min，流動相A的體積分數為99％；

18～35mim，流動相A的體積分數由99％下降至40％；

35～40mim，流動相A的體積分數保持為40％；

40～41mim，流動相A的體積分數由40％上升至99％；

41～50mim，流動相A的體積分數保持為99％。

流速：1.0±0.1mL/mim；

柱溫箱溫度：30±5℃；

進樣量：20μl。