[發明專利]同時檢測鹽酸法舒地爾中基因毒性雜質5-異喹啉磺酸甲酯和5-異喹啉磺酸乙酯的方法

有效

• 申請號: 202010690141.6
• 申請日: 2020-07-17
• 公開（公告）號: CN111624276B
• 公開（公告）日: 2021-04-09
• 發明（設計）人: 劉宇晶;鄭柏松;孫麗;王金泉;萬忠民;諶宗永
• 申請（專利權）人: 北京陽光諾和藥物研究股份有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/86
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 王春霞

1.一種同時檢測鹽酸法舒地爾中基因毒性雜質5-異喹啉磺酸甲酯和5-異喹啉磺酸乙酯的方法，包括如下步驟：

采用HPLC檢測鹽酸法舒地爾中的雜質5-異喹啉磺酸甲酯和5-異喹啉磺酸乙酯，實現對鹽酸法舒地爾中5-異喹啉磺酸甲酯和5-異喹啉磺酸乙酯的定性檢測或定量檢測；

所述HPLC檢測的條件如下：

固定相：固定相為十八烷基硅烷鍵合硅膠；

色譜柱：InertSustain AQ-C18，規格為250×4.6mm，5μm；

檢測波長：238nm；

流動相A：體積分數為0.5％的三乙胺水溶液，采用磷酸調pH至7.0；

流動相B：甲醇；

洗脫方式：梯度洗脫；

所述梯度洗脫的程序為：

0～18min，流動相A的體積分數為99％；

18～35mim，流動相A的體積分數由99％下降至40％；

35～40mim，流動相A的體積分數保持為40％；

40～41mim，流動相A的體積分數由40％上升至99％；

41～50mim，流動相A的體積分數保持為99％；

流速：1.0±0.1mL/mim；

柱溫箱溫度：30±5℃；

進樣量：20μl；

按照下述步驟實現對鹽酸法舒地爾中5-異喹啉磺酸甲酯和5-異喹啉磺酸乙酯的定性檢測：

若色譜圖中出現與5-異喹啉磺酸甲酯和5-異喹啉磺酸乙酯的對照品保留一致的色譜峰，則待測的鹽酸法舒地爾中含有雜質5-異喹啉磺酸甲酯和5-異喹啉磺酸乙酯，實現對鹽酸法舒地爾中5-異喹啉磺酸甲酯和5-異喹啉磺酸乙酯的定性檢測；

按照下述步驟實現對鹽酸法舒地爾中5-異喹啉磺酸甲酯和5-異喹啉磺酸乙酯的定量檢測：

(1)將待測的鹽酸法舒地爾配制成供試品溶液，將5-異喹啉磺酸甲酯和5-異喹啉磺酸乙酯配制成混合對照品溶液；

采用稀釋劑配制所述供試品溶液和所述混合對照品溶液，所述稀釋劑為體積分數為0.5％的三乙胺水溶液，采用磷酸調pH至7.0；

所述供試品溶液中所述鹽酸法舒地爾的濃度為4.5～5.5mg/ml；

所述混合對照品溶液中所述5-異喹啉磺酸甲酯和所述5-異喹啉磺酸乙酯的濃度均為0.072～0.088μg/ml；

(2)將所述混合對照品溶液進行所述HPLC檢測，得到所述混合對照品溶液中5-異喹啉磺酸甲酯和5-異喹啉磺酸乙酯的色譜峰面積；

(3)將所述供試品溶液進行所述HPLC檢測，得到所述供試品溶液中5-異喹啉磺酸甲酯和5-異喹啉磺酸乙酯的色譜峰面積；

(4)按照式(1)即得到所述供試品溶液中5-異喹啉磺酸甲酯和5-異喹啉磺酸乙酯的含量；

式中，C_x為供試品溶液中5-異喹啉磺酸甲酯或5-異喹啉磺酸乙酯的濃度；C_R為混合對照品溶液中5-異喹啉磺酸甲酯或5-異喹啉磺酸乙酯的濃度；A_X為供試品溶液中5-異喹啉磺酸甲酯或5-異喹啉磺酸乙酯的峰面積；A_R為混合對照品溶液中5-異喹啉磺酸甲酯或5-異喹啉磺酸乙酯的峰面積。