[發明專利]一種檢測棘球蚴病的膠體金試紙條及其制備方法

在審

• 申請號: 202010690018.4
• 申請日: 2020-07-17
• 公開（公告）號: CN111796103A
• 公開（公告）日: 2020-10-20
• 發明（設計）人: 韓秀敏;蔡其剛
• 申請（專利權）人: 青海省人民醫院;青海省畜牧獸醫科學院
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/58;G01N33/558;G01N33/532;G01N33/531
• 代理公司: 蘭州振華專利代理有限責任公司 62102
• 代理人: 張晉

1.一種檢測棘球蚴病的膠體金試紙條的制備方法，其特征在于所述方法包括如下步驟：

（1）膠體金溶液的制備：在100 mL去離子水中加入1 mL 1%的氯金酸溶液，沸騰1 min，加入1%檸檬酸鈉溶液2.1 mL，加熱至顏色為酒紅色；

（2）膠體金標記山羊抗人IgG Fc及純化：取步驟（1）所得的膠體金溶液1.5 mL，調節pH值至6.5，加入15μg的山羊抗人IgG Fc抗體，室溫下反應40 min，加入30 μL 10%的BSA，靜置30 min；4℃ 5000rpm離心30 min，棄沉淀，4℃ 9000rpm離心30 min，吸去上清，沉淀物用金標結合物復溶液稀釋至0.15ml，得到純化的山羊抗人IgG Fc-膠體金復合物；

（3）金標墊、樣品墊處理：將玻璃纖維膜浸泡于封閉液中30 min，37~40℃烘干，備用；將樣品墊浸泡于0.01 M pH7.4磷酸緩沖液中30 min，37±2℃烘干12~18 h，備用；

（4）噴金與劃膜：將步驟（2）獲得的山羊抗人IgG Fc-膠體金復合物以2.0 μL/cm噴在步驟（3）處理過的金標墊上，37℃烘干24 h；將濃度為0.5 mg/mL的EmAgB3-GGGS-Em18重組蛋白為抗原以1.0 μL/cm劃T線，濃度為1 mg/mL的人IgG1以1.0 μL/cm劃C線，37℃烘干24 h；

（5）組裝：將各個部分組裝成膠體金試紙，切成試紙條。

2.一種采用權利要求1所述的方法制成的試紙條，其特征在于所述試紙條可以用來檢測棘球蚴病。