[發明專利]痔寧片HPLC標準指紋圖譜的構建方法及其應用

有效

• 申請號: 202010686116.0
• 申請日: 2020-07-16
• 公開（公告）號: CN111693630B
• 公開（公告）日: 2023-07-04
• 發明（設計）人: 戚建中;李軍;李柯;陳丹;唐湘黔;劉春方;龔小兵;陳光建;符國成;陳海剛
• 申請（專利權）人: 華潤三九（郴州）制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/34;G01N30/86
• 代理公司: 郴州大天知識產權事務所(普通合伙) 43212
• 代理人: 徐起堂

本發明公開了一種痔寧片HPLC標準指紋圖譜的構建方法，包括如下步驟：(1)取芍藥苷對照品、黃芩苷對照品、沒食子酸對照品、柚皮苷對照品、橙皮苷對照品、蘆丁對照品、楊梅苷對照品，用50%甲醇溶液溶解，制成混合對照品溶液；(2)取痔寧片粉末1.0g，置具塞錐形瓶中，加入50mL50%的甲醇溶液，超聲處理30min，冷卻，并以50%的甲醇溶液補重，搖勻，濾過，取續濾液；(3)將樣品溶液在高效液相色譜中進行梯度洗脫，得到HPLC標準指紋圖譜。還公開了一種根據上述構建方法得到的標準指紋圖譜在痔寧片質量檢測方面的應用。本方法更能準確的把關藥品的質量，保證痔寧片的質量穩定性。

技術領域

本發明涉及痔寧片的質量檢測領域，具體而言，涉及一種痔寧片HPLC標準指紋圖譜的構建方法及其應用。

背景技術

痔寧片收錄于2015版《中國藥典》一部，由地榆炭、側柏葉炭、地黃、槐米、酒白芍、荊芥炭、當歸、黃芩、枳殼、刺猬皮（制）、烏梅、甘草制得。功能為清熱涼血，潤躁疏風，用于實熱內結或濕熱瘀滯所致的痔瘡出血，腫痛。痔寧片現有的質量監控體系是采用HPLC法測定本品中蘆丁的含量測定；采用薄層色譜對地黃、酒白芍、當歸、枳殼進行鑒別，采用HPLC法對黃芩進行鑒別。含量測定成分單一，不能客觀地從整體上評價中藥的內在質量。

發明內容

本發明的目的在于提供一種痔寧片指紋圖譜建立方法及其應用，該方法能有效的表征其質量，克服現有技術質量控制方法的單一性的缺陷，實現全方位多方面的檢測痔寧片，以提高痔寧片整體的品質，完善質量檢測體系，利于藥品本身的擴大應用范圍。

本發明的痔寧片HPLC標準指紋圖譜的構建方法，包括如下步驟：

(1)取芍藥苷對照品、黃芩苷對照品、沒食子酸對照品、柚皮苷對照品、橙皮苷對照品、蘆丁對照品、楊梅苷對照品，用50%甲醇溶液溶解，制成混合對照品溶液，每1mL混合對照品溶液中含芍藥苷60μg、黃芩苷0.2mg、沒食子酸25μg、柚皮苷0.2mg、橙皮苷35μg、蘆丁0.2mg、楊梅苷0.1mg；

(2)取痔寧片粉末1.0g，置具塞錐形瓶中，加入50mL50%的甲醇溶液，稱重，超聲處理30min，冷卻，重新稱重，并以50%的甲醇溶液補重，搖勻，濾過，取續濾液；

?(3)將樣品溶液在高效液相色譜中進行梯度洗脫，得到HPLC標準指紋圖譜；高效液相色譜的流動相A為乙腈，流動相B為體積分數0.05-0.2％的磷酸水溶液。

優選地，所述痔寧片用地榆炭、側柏葉炭、地黃、槐米、酒白芍、荊芥炭、當歸、黃芩、枳殼、刺猬（制）、烏梅、甘草；所述痔寧片的制備方法為：當歸、枳殼提取揮發油，蒸餾后的水溶液另器收集，藥渣與地榆炭、側柏葉炭、地黃、槐米、酒白芍、荊芥炭、黃芩、刺猬皮（制）、烏梅?、甘草，加水煎煮二次，每次3小時，濾過，合并濾液，濾液與上述蒸餾后的水溶液合并，減壓濃縮至相對密度為1.30～1.35（80℃）的清膏，低溫干燥，粉碎，制粒，噴入上述揮發油，壓片，包薄膜衣。

優選地，流動相B為體積分數0.1％的磷酸水溶液。

優選地，高效液相色譜的操作條件是：Welch?ultimate?AQ-C18色譜柱250mm×4.6mm，5μm；流動相A為乙腈，流動相B為體積分數0.1％的磷酸水溶液，梯度洗脫；柱溫：30℃；流速：1.0mL/min；進樣量10μL，洗脫程序是：

0～40min流動相A：B由5％：95％→20％：80％；

40～50min流動相A：B由20％：80％→24％：76％；

50～60min流動相A：B由24％：76％→30％：70％；

60～70min流動相A：B由30％：70％→35％：65％；

70～85min流動相A：B由35％：65％→5％：95％；流動相A與B的比例為體積比。