[發明專利]痔寧片HPLC標準指紋圖譜的構建方法及其應用

有效

• 申請號: 202010686116.0
• 申請日: 2020-07-16
• 公開（公告）號: CN111693630B
• 公開（公告）日: 2023-07-04
• 發明（設計）人: 戚建中;李軍;李柯;陳丹;唐湘黔;劉春方;龔小兵;陳光建;符國成;陳海剛
• 申請（專利權）人: 華潤三九（郴州）制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/34;G01N30/86
• 代理公司: 郴州大天知識產權事務所(普通合伙) 43212
• 代理人: 徐起堂

1.一種痔寧片HPLC標準指紋圖譜的構建方法，其特征在于，包括如下步驟：

?(1)取芍藥苷對照品、黃芩苷對照品、沒食子酸對照品、柚皮苷對照品、橙皮苷對照品、蘆丁對照品、楊梅苷對照品，用50%甲醇溶液溶解，制成混合對照品溶液，每1mL混合對照品溶液中含芍藥苷60μg、黃芩苷0.2mg、沒食子酸25μg、柚皮苷0.2mg、橙皮苷35μg、蘆丁0.2mg、楊梅苷0.1mg；

(2)取痔寧片粉末1.0g，置具塞錐形瓶中，加入50mL40-60%的甲醇溶液，稱重，超聲處理30min，冷卻，重新稱重，并以40-60%的甲醇溶液補重，搖勻，濾過，取續濾液；

?(3)將樣品溶液在高效液相色譜中進行梯度洗脫，得到HPLC標準指紋圖譜；高效液相色譜的流動相A為乙腈，流動相B為體積分數0.05-0.2％的磷酸水溶液；

高效液相色譜的操作條件是：Welch?ultimate?AQ-C18?色譜柱250?mm?×4.6?mm，5μm；梯度洗脫；柱溫：30℃；流速：1.0mL/min；進樣量10μL，洗脫程序是：0～40min流動相A：B由5％：95％→20％：80％；40～50min流動相A：B由20％：80％→24％：76％；50～60min流動相A：B由24％：76％→30％：70％；60～70min流動相A：B由30％：70％→35％：65％；70～85min流動相A：B由35％：65％→5％：95％；

檢測波長為225-235nm。

2.?如權利要求1所述的構建方法，其特征在于，所述痔寧片用地榆炭、側柏葉炭、地黃、槐米、酒白芍、荊芥炭、當歸、黃芩、枳殼、制刺猬皮、烏梅、甘草；所述痔寧片的制備方法為：當歸、枳殼提取揮發油，蒸餾后的水溶液另器收集，藥渣與地榆炭、側柏葉炭、地黃、槐米、酒白芍、荊芥炭、黃芩、制刺猬皮、烏梅?、甘草，加水煎煮二次，每次3小時，濾過，合并濾液，濾液與上述蒸餾后的水溶液合并，80℃減壓濃縮至相對密度為1.30～1.35的清膏，低溫干燥，粉碎，制粒，噴入上述揮發油，壓片，包薄膜衣。

3.如權利要求1所述的構建方法，其特征在于，流動相B為體積分數0.1％的磷酸水溶液。

4.如權利要求1所述的構建方法，其特征在于，步驟(1)和步驟(2)中的甲醇溶液的體積分數均為50％。

5.一種根據權利要求1-4任一項所述的構建方法得到的標準指紋圖譜在痔寧片質量檢測方面的應用。

6.如權利要求5所述的應用，其特征在于，將痔寧片制成待測品溶液，在與權利要求1-4任一項所述的構建方法中所使用的相同的高效液相色譜操作條件下進行梯度洗脫得到待測品HPLC指紋圖譜，并與HPLC標準指紋圖譜進行對比。