[發(fā)明專利]一種從小麥面筋蛋白中酶法制備富含IPP和VPP水解物的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010660556.9
• 申請日: 2020-07-10
• 公開（公告）號: CN111919963B
• 公開（公告）日: 2021-06-01
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 黃國清;肖軍霞;張志凱;周會欽;郭麗萍;李曉丹;滕靜
• 申請（專利權(quán)）人: 青島農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C07K5/08
• 分類號: C07K5/08;A23J3/18;A23J3/34;A23L33/18;A23L5/20;A23L5/40
• 代理公司: 青島合創(chuàng)知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 37264
• 代理人: 王曉曉

本發(fā)明公開了一種從小麥面筋蛋白中酶法制備富含IPP和VPP水解物的方法，包括以下步驟：（1）將小麥面筋蛋白在堿性溶液中溶解，再經(jīng)超聲處理；（2）將堿性蛋白酶加入到小麥面筋蛋白溶液中水解；（3）調(diào)節(jié)堿性水解液的pH值至中性或弱酸性，同時(shí)加入蛋白酶水解后高溫滅酶；（4）水解液進(jìn)行離心取上清液，并用超濾膜超濾；（5）透過液用大孔樹脂進(jìn)行脫色和脫苦；（6）脫色脫苦液用離子交換樹脂進(jìn)行吸附后，對離子交換樹脂進(jìn)行洗脫，再干燥，得到富含IPP和VPP的水解物粉末。本發(fā)明通過多種蛋白酶酶解制得富含IPP和VPP的水解物，該制備方法的蛋白質(zhì)回收率高、水解產(chǎn)物的IPP和VPP含量豐富、體內(nèi)降血壓功效明確。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于蛋白質(zhì)水解技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種從小麥面筋蛋白中酶法制備富含IPP和VPP水解物的方法。

背景技術(shù)

Ile-Pro-Pro（IPP）和Val-Pro-Pro（VPP）是兩種具有明確體內(nèi)降血壓功效的多肽。因?yàn)檫@兩種三肽以及Leu-Pro-Pro（LPP）最初是從瑞士乳桿菌發(fā)酵的酸奶中產(chǎn)生的，所以把這三種三肽合稱為乳三肽，其中IPP位于β-酪蛋白的74-76位和κ-酪蛋白的84-86位、VPP位于β-酪蛋白的108-110位、LPP位于β-酪蛋白的151-153位。IPP和VPP對輕度高血壓患者具有明確的預(yù)防和治療作用，目前酪蛋白是乳三肽的唯一來源。為了開發(fā)新型的基于乳三肽的降血壓產(chǎn)品，尋找除酪蛋白以外的乳三肽新來源具有重要意義。

小麥?zhǔn)鞘澜缟献钪匾霓r(nóng)作物之一，其生產(chǎn)面粉后的副產(chǎn)物小麥面筋蛋白來源極其豐富、蛋白質(zhì)含量也很高。小麥面筋蛋白主要由麥醇溶蛋白和麥谷蛋白組成，其中麥醇溶蛋白占小麥蛋白總量的40%-50%、麥谷蛋白占小麥蛋白總質(zhì)量的30%-40%，另有少量的淀粉、纖維、糖、脂肪和礦物質(zhì)等。小麥面筋蛋白的氨基酸組成中，脯氨酸約占氨基酸總量的16%，表明其可能是乳三肽的潛在來源。美國國家生物信息中心（NCBI）的氨基酸序列查詢結(jié)果表明，小麥面筋蛋白的α--醇溶蛋白（ABQ52121）和ω-醇溶蛋白（AAA34289）中分別含有1個(gè)和4個(gè)IPP片段、γ-醇溶蛋白（AAT01617）和HMW-GS（CAC40686）分別含有1個(gè)VPP片段（見表1~4），證實(shí)了小麥面筋蛋白是IPP、VPP的良好來源。如果能夠?qū)PP、VPP從小麥面筋蛋白中定向釋放出來，這對于尋找乳三肽除酪蛋白外的新來源、提高小麥面筋蛋白的綜合利用價(jià)值具有重要意義。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種從小麥面筋蛋白中酶法制備富含IPP和VPP水解物的方法，本發(fā)明通過多種蛋白酶酶解小麥面筋粉，然后通過精制制得富含IPP和VPP的水解物，該制備方法的蛋白質(zhì)回收率高、水解產(chǎn)物的IPP和VPP豐富、體內(nèi)降血壓功效明確。

為實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案予以實(shí)現(xiàn)：

本發(fā)明提供了一種從小麥面筋蛋白中酶法制備富含IPP和VPP水解物的方法，包括以下步驟：

（1）將小麥面筋蛋白在pH值為9.0~13.0的堿性溶液中溶解，再經(jīng)超聲處理，，得到小麥面筋蛋白溶液；

（2）將堿性蛋白酶加入到所述小麥面筋蛋白溶液中，在水浴搖床或水解罐內(nèi)于40~60℃和100~150r/min轉(zhuǎn)速下水解2~8h，得到水解液；

（3）調(diào)節(jié)所述水解液的pH值至中性或弱酸性，同時(shí)加入蛋白酶水解，在45~75℃，100~130r/min的轉(zhuǎn)速下水解2~6h，100℃滅酶10~15min，得到水解液；

（4）所述水解液滅酶離心取上清液，并用超濾膜超濾，收集透過液；

（5）所述透過液用大孔樹脂進(jìn)行脫色脫苦，得到脫苦脫色液；

（6）所述脫色脫苦液用離子交換樹脂進(jìn)行吸附后，對離子交換樹脂進(jìn)行洗脫，得到富含IPP和VPP的水解物；

（7）對水解物進(jìn)行干燥，得到富含IPP和VPP的小麥面筋蛋白水解物粉末。