[發明專利]卵巢癌標志物CA125的定量檢測試劑盒

在審

• 申請號: 202010655215.2
• 申請日: 2020-07-09
• 公開（公告）號: CN111537728A
• 公開（公告）日: 2020-08-14
• 發明（設計）人: 周華深;胡守旺;黃若磐
• 申請（專利權）人: 廣州瑞博奧生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/58
• 分類號: G01N33/58;G01N33/577;G01N33/574;G01N33/543
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 肖宇揚;付靜

1.一種卵巢癌標志物CA125的定量檢測試劑盒，所述試劑盒包括以下組分：

（1）已經包被了CA125的捕獲抗體的酶標板；

（2）檢測抗體體系，所述檢測抗體體系通過以下方式制備得到：

a. 在二氧化硅納米微球表面負載CdSe量子點，得到第一復合物，

b．對第一復合物進行硅烷化修飾，得到第二復合物，

c．對第二復合物進行環氧化修飾，得到第三復合物，

d．在第三復合物表面修飾上能夠直接連接或間接連接所述捕獲抗體且被辣根過氧化物酶標記的檢測抗體。

2.如權利要求1所述的定量檢測試劑盒，其中所述二氧化硅納米微球的粒徑小于100nm，所述CdSe量子點的粒徑小于5nm。

3.如權利要求1所述的定量檢測試劑盒，所述試劑盒還包括：

（3）CA125標準品；

（4）洗滌液；

（5）顯色液；

（6）酶反應終止液；

（7）稀釋液。

4.如權利要求1所述的定量檢測試劑盒，其中所述第一復合物通過以下方式制備：在二氧化硅納米微球中加入CdSe量子點，超聲直至溶液澄清，然后將溶液在10000～12000 rpm轉速下離心5～10min，洗去多余的CdSe量子點，即可得到純化的所述第一復合物。

5.如權利要求1所述的定量檢測試劑盒，其中所述第二復合物通過以下方式制備：在超聲條件下向所述第一復合物沉淀中加入正辛基三甲氧基硅烷，隨后依次加入甲醇以及氨水，混合超聲20～60min，最后用6000～10000 rpm轉速離心，洗去多余的正辛基三甲氧基硅烷，即可得到純化的所述第二復合物。

6.如權利要求1所述的定量檢測試劑盒，其中所述第三復合物通過以下方式制備：將所述第二復合物加入到硅酸鈉溶液中，攪拌反應12h以上，然后在溶液加入乙醇、氨水和原硅酸四乙酯，攪拌反應20～60min以上，最后加入γ-(2,3-環氧丙氧基)丙基三甲氧基硅烷，攪拌反應8～12h，離心洗滌3次，即可得到純化的所述第三復合物。

7.如權利要求1所述的定量檢測試劑盒，其中檢測抗體通過以下方式修飾到第三復合物上：將第三復合物分散至硼酸鹽緩沖液中，加入被生物素標記的檢測抗體，在室溫下攪拌10～12h，所得到的產物用磷酸鹽緩沖洗滌，即可得到所述檢測抗體體系。

8.如權利要求1所述的定量檢測試劑盒，其中所述捕獲抗體為OC125單克隆抗體或M11單克隆抗體。

9.如權利要求3所述的定量檢測試劑盒，其中：

所述洗滌液為0.05%含有吐溫-20的PBS緩沖液；

所述顯色液為TMB顯色液；

所述酶反應終止液為2 M的濃硫酸；

所述稀釋液為含1.37%酪蛋白的pH7.4的磷酸鹽緩沖液。