[發明專利]一種個體化用藥相關基因多態性檢測試劑盒及其應用

在審

• 申請號: 202010650700.0
• 申請日: 2020-07-08
• 公開（公告）號: CN111793682A
• 公開（公告）日: 2020-10-20
• 發明（設計）人: 廖南清;梁浩;袁志兵;張林峰
• 申請（專利權）人: 廣西醫大睿谷醫學檢驗有限公司
• 主分類號: C12Q1/6883
• 分類號: C12Q1/6883;C12Q1/6858;C12N15/11
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• 代理人: 暫無信息

1.一種個體化用藥相關基因多態性的特異性引物探針組合，其特征在于，所述引物探針組合包括針對rs16960228、rs1801253、rs12750834、rs776746基因SNP的特異性寡核苷酸引物和特異性熒光標記MGB探針，具體如下：

rs16960228引物探針序列為：

上游引物5’-3’：AGCTGTGGGCTGGATTCTGT

下游引物5’-3’：ATGCTGGTCACTCTCCTCTTTCTG

探針一5’-3’：TAAGGTCACACATAAAG

探針二5’-3’：TAAGGTCACACGTAAAG

rs1801253引物探針序列為：

上游引物5’-3’：AGCCCCGACTTCCGCA

下游引物5’-3’：GTCTCCGTGGGTCGCGT

探針一5’-3’：CCTTCCAGGGACTG

探針二5’-3’：CCTTCCAGCGACTG

rs12750834引物探針序列為：

上游引物5’-3’：GAATGCCTCCCAAGATTGATG

下游引物5’-3’：CCTTAGAACACCAAAGCAGGCTTA

探針一5’-3’：CTGTAAGTGCCCTCAG

探針二5’-3’：CTGTAAGTGCCCCCAGA

rs776746引物探針序列為：

上游引物5’-3’：GATGAAGGGTAATGTGGTCCAAA

下游引物5’-3’：TGCTCTACTGTCATTTCTAACCATAATCT

探針一5’-3’：AGGGAAGAGATACTG

探針二5’-3’：AAGAGATATTGAAAGACA。

2.一種個體化用藥相關基因多態性檢測試劑盒，其特征在于，包括如權利要求1所述的特異性引物探針組合的PCR混合液，所述PCR混合液分別為rs16960228、rs1801253、rs12750834、rs776746 PCR混合液，所述PCR混合液還包括Tris-HCl、KCl、MgCl₂、dNTPs。

3.如權利要求2所述的個體化用藥相關基因多態性檢測試劑盒，其特征在于，所述PCR混合液中引物對的濃度為 0.20μM；探針對的濃度為 0.12μM。

4.如權利要求2所述的個體化用藥相關基因多態性檢測試劑盒，其特征在于，還包括DNA聚合酶和陽性質控品A、陽性質控品B、陽性質控品C、陽性質控品D，所述的陽性質控品A為含2個rs16960228等位基因位點的質粒混合液，陽性質控品B為含2個rs1801253等位基因位點的質粒混合液；陽性質控品C為含2個rs12750834等位基因位點的質粒混合液，陽性質控品D為含2個rs776746等位基因位點的質粒混合液。

5.如權利要求4所述的個體化用藥相關基因多態性檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒用于PCR擴增反應體系為：36.5μl PCR混合液、0.5 μl的DNA聚合酶、3μl模板DNA，總體積40μl。

6.如權利要求5所述的個體化用藥相關基因多態性檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒用于PCR擴增反應體系的擴增程序為：95℃，5分鐘，1個循環；95℃，45秒鐘，58℃，1分鐘，40個循環；38℃，5 秒鐘，1個循環。

7.如權利要求2-6任一項所述的個體化用藥相關基因多態性檢測試劑盒的應用，其特征在于，所述的應用為同時指導美托洛爾、氫氯噻嗪、纈沙坦、氨氯地平的個體化用藥。