[發明專利]食藥用真菌中總三萜含量的測定方法

在審

• 申請號: 202010650662.9
• 申請日: 2020-07-08
• 公開（公告）號: CN111929293A
• 公開（公告）日: 2020-11-13
• 發明（設計）人: 劉笑笑;魏春雁;華晶忠;王瑩;李勝男;李君梅;王瑩;郝麗珊;樊慧梅;高晗;馬虹;魯曉婷;王嵩
• 申請（專利權）人: 吉林省農業科學院
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N21/01
• 代理公司: 蘇州中合知識產權代理事務所(普通合伙) 32266
• 代理人: 李中華

本發明揭示了一種食藥用真菌中總三萜含量的測定方法，包括，采用熊果酸標準品配置不同濃度的標準溶液；用可見分光光度計在設定波長下測定吸光度，以吸光度為縱坐標，以熊果酸含量為橫坐標，繪制標準曲線；稱取樣品粉末0.10?0.5g置于三角瓶中，向樣品粉末中加入30?80ml浸提劑，超聲波提取30?90min，得到浸提液；將所述浸提液的上清液移至100ml容量瓶中，定容，得到待測溶液；吸取所述待測溶液1.0ml于具塞比色管中，水浴蒸干溶劑；向所述比色管中加入0.10?0.30mL香草醛?冰乙酸溶液和0.70?0.90mL高氯酸，搖勻，水浴加熱后冷卻，再調至室溫，加入冰乙酸稀釋，在20?90min內用可見分光光度計在設定波長下測定吸光度。本發明的方法簡單、便于操作，檢測成本低。測定結果準確可靠。

技術領域

本發明涉及檢測技術領域，具體涉及一種食藥用真菌中總三萜含量的測定方法。

背景技術

三萜類化合物是靈芝、桑黃、樺樹茸等食、藥用真菌主要活性成分，具有護肝排毒、抗氧化、抑制腫瘤、抗菌、抗炎、抗病毒等活性。總三萜含量的高低，是評價此類食、藥用真菌質量的重要指標。大型真菌中的三萜類化合物，具有提高人體免疫力、抑制腫瘤的復發與轉移、抗高血壓、保肝等多種生物活性，沒有精確的測定總三萜的標準方法，對含有三萜類成分的真菌的品質和功能進行評價，就缺少科學依據。而藥用真菌中總三萜含量測定的簡單、快捷和精準性，對于指導菌農和企業高質量生產、評價交易產品質量水平等具有十分重要的意義。

目前，總三萜的檢測方法有分光光度法、高效液相色譜法、薄層色譜-液相色譜/質譜法等，但是現有的方法中，存在測定成本較高，測定結果誤差較大，操作復雜的問題。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的缺陷，提供一種食藥用真菌中總三萜含量的測定方法，以解決現有技術中測定測本較高，測定結果誤差較大，操作復雜的問題。

為實現上述目的，本發明提出食藥用真菌中總三萜含量的測定方法，包括：

標準溶液的制備：稱取熊果酸標準品0.01g，用三氯甲烷溶解并定容至100mL，移取0.1mg/mL的熊果酸標準品液0.00mL、0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.00mL、1.20mL分別于25mL具塞比色管中，水浴蒸干溶劑，分別加入0.20mL香草醛-冰乙酸溶液和0.80mL高氯酸，搖勻，再分別向每一個個具塞比色管中加5.00mL冰乙酸稀釋，搖勻，得到不同濃度的標準溶液；

標準曲線的繪制：分別取上述不同濃度的所述標準溶液于比色皿中，以0.00mL比色管做參比，20min-90min內用可見分光光度計在設定波長下測定吸光度，以吸光度為縱坐標，以熊果酸含量為橫坐標，繪制標準曲線；

待測樣品溶液的制備：稱取樣品粉末0.10-0.5g置于三角瓶中，向樣品粉末中加入30-80ml浸提劑，超聲波提取30-90min，得到浸提液；將所述浸提液的上清液移至100ml容量瓶中，定容，得到待測溶液；

待測溶液的測定：吸取所述待測溶液1.0ml于具塞比色管中，水浴蒸干溶劑；向所述比色管中加入0.10-0.30mL香草醛-冰乙酸溶液和0.70-0.90mL高氯酸，搖勻，水浴加熱后冷卻，再調至室溫，加入冰乙酸稀釋，在20-90min內用可見分光光度計在設定波長下測定吸光度。

優選地，所述標準曲線的繪制包括：分別取上述不同濃度的所述標準溶液于比色皿中，以0.00mL比色管做參比，30min內用可見分光光度計在設定波長下測定吸光度，以吸光度為縱坐標，以熊果酸含量為橫坐標，繪制標準曲線。

優選地，所述待測樣品溶液的制備包括：稱取樣品粉末0.25-0.40g置于三角瓶中，向樣品粉末中加入50ml三氯甲烷，超聲波提取60min，得到浸提液；將所述浸提液的上清液移至100ml容量瓶中，定容，得到待測溶液。