[發(fā)明專利]食藥用真菌中總?cè)坪康臏y定方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010650662.9
• 申請日: 2020-07-08
• 公開（公告）號: CN111929293A
• 公開（公告）日: 2020-11-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉笑笑;魏春雁;華晶忠;王瑩;李勝男;李君梅;王瑩;郝麗珊;樊慧梅;高晗;馬虹;魯曉婷;王嵩
• 申請（專利權(quán)）人: 吉林省農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類號: G01N21/78
• 分類號: G01N21/78;G01N21/01
• 代理公司: 蘇州中合知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 32266
• 代理人: 李中華

1.一種食藥用真菌中總?cè)坪康臏y定方法，其特征在于，包括：

標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備：稱取熊果酸標(biāo)準(zhǔn)品0.01g，用三氯甲烷溶解并定容至100mL，移取0.1mg/mL的熊果酸標(biāo)準(zhǔn)品液0.00mL、0.20mL、0.40mL、0.60mL、0.80mL、1.00mL、1.20mL分別于25mL具塞比色管中，水浴蒸干溶劑，分別加入0.20mL香草醛-冰乙酸溶液和0.80mL高氯酸，搖勻，再分別向每一個個具塞比色管中加5.00mL冰乙酸稀釋，搖勻，得到不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液；

標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制：分別取上述不同濃度的所述標(biāo)準(zhǔn)溶液于比色皿中，以0.00mL比色管做參比，20min-90min內(nèi)用可見分光光度計在設(shè)定波長下測定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，以熊果酸含量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線；

待測樣品溶液的制備：稱取樣品粉末0.10-0.5g置于三角瓶中，向樣品粉末中加入30-80ml浸提劑，超聲波提取30-90min，得到浸提液；將所述浸提液的上清液移至100ml容量瓶中，定容，得到待測溶液；

待測溶液的測定：吸取所述待測溶液1.0ml于具塞比色管中，水浴蒸干溶劑；向所述比色管中加入0.10-0.30mL香草醛-冰乙酸溶液和0.70-0.90mL高氯酸，搖勻，水浴加熱后冷卻，再調(diào)至室溫，加入冰乙酸稀釋，在20-90min內(nèi)用可見分光光度計在設(shè)定波長下測定吸光度。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的測定方法，其特征在于，所述標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制包括：分別取上述不同濃度的所述標(biāo)準(zhǔn)溶液于比色皿中，以0.00mL比色管做參比，30min內(nèi)用可見分光光度計在設(shè)定波長下測定吸光度，以吸光度為縱坐標(biāo)，以熊果酸含量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的測定方法，其特征在于，所述待測樣品溶液的制備包括：稱取樣品粉末0.25-0.40g置于三角瓶中，向樣品粉末中加入50ml三氯甲烷，超聲波提取60min，得到浸提液；將所述浸提液的上清液移至100ml容量瓶中，定容，得到待測溶液。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的測定方法，其特征在于，將所述浸提液的上清液移至100ml容量瓶中，定容，包括：將所述浸提液的上清液移至100ml容量瓶中后，再用少量浸提劑洗滌所述三角瓶，洗滌液一并轉(zhuǎn)移到容量瓶中以浸提劑定容，搖勻。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的測定方法，其特征在于，所述待測溶液的測定包括：吸取所述待測溶液1.0ml于具塞比色管中，常壓水浴蒸干溶劑，向所述比色管中加入0.20mL香草醛-冰乙酸溶液和0.80mL高氯酸，搖勻，70℃水浴加熱15min后冷卻5min，再調(diào)至室溫，加入冰乙酸5.0ml稀釋，在30分鐘內(nèi)用可見分光光度計在設(shè)定波長下下測定吸光度。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項所述的測定方法，其特征在于，所述設(shè)定波長為548nm。

7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的測定方法，其特征在于，所述樣品為食藥用真菌。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于，所述食藥用真菌為桑黃、樺樹茸或靈芝。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于，所述樣品為桑黃或樺樹茸時，稱取樣品粉末0.25g，當(dāng)所述樣品為靈芝時，稱取樣品0.40g。