[發(fā)明專利]一種銅摻雜的Tb基MOF檢測(cè)CYFRA 21-1的電化學(xué)發(fā)光免疫傳感器的制備方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202010638197.7
• 申請(qǐng)日: 2020-07-06
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN111830102A
• 公開(kāi)（公告）日: 2020-10-27
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 鞠熀先;周麗敏;魏琴;任祥;王超;范大偉;吳丹;馬洪敏
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 濟(jì)南大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N27/30
• 分類號(hào): G01N27/30;G01N27/327;G01N27/48;G01N21/76
• 代理公司: 濟(jì)南譽(yù)豐專利代理事務(wù)所(普通合伙企業(yè)) 37240
• 代理人: 趙鳳

本發(fā)明涉及一種銅摻雜的Tb基MOF檢測(cè)CYFRA 21?1的電化學(xué)發(fā)光免疫傳感器的制備方法。具體是采用銅摻雜的Tb基MOF作為傳感界面，銅摻雜的Tb基MOF具有大的比表面積和穩(wěn)定的電化學(xué)發(fā)光信號(hào)。AuPdPt納米花與銅摻雜的Tb基MOF復(fù)合，能夠提高銅摻雜的Tb基MOF的導(dǎo)電性，并且貴金屬納米花具有催化活性，能夠進(jìn)一步放大電化學(xué)發(fā)光信號(hào)。本發(fā)明對(duì)CYFRA 21?1檢測(cè)的線性范圍為0.1 pg·mL^?1?100 ng·mL^?1，檢測(cè)限為32 fg·mL^?1。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種銅摻雜的Tb基MOF檢測(cè)CYFRA 21-1的電化學(xué)發(fā)光免疫傳感器的制備方法。具體是采用銅摻雜的Tb基MOF與AuPdPt納米花的復(fù)合物作為發(fā)光材料和傳感界面，制備了一種檢測(cè)CYFRA 21-1的電化學(xué)發(fā)光免疫傳感器，屬于電化學(xué)發(fā)光傳感器領(lǐng)域。

背景技術(shù)

肺癌發(fā)病率的逐年增長(zhǎng)使我們必須重視對(duì)肺癌早期準(zhǔn)確的診斷和治療，以延長(zhǎng)病人的壽命、改善其生活質(zhì)量。因此，尋找靈敏而特異的生化指標(biāo)協(xié)助診斷就成了當(dāng)務(wù)之急。細(xì)胞角蛋白19片段21-1（CYFRA21-1）是細(xì)胞角蛋白19的可溶性片段，當(dāng)腫瘤細(xì)胞死亡或者發(fā)生溶解時(shí)，大量的CYFRA 21-1會(huì)釋放進(jìn)入腫瘤患者的血液循環(huán)內(nèi)，進(jìn)而使血清CYFRA 21-1水平顯著升高，因此能作為診斷肺癌的一個(gè)首選標(biāo)志物。如何高效靈敏地檢測(cè)CYFRA 21-1是目前亟待解決的問(wèn)題。

目前常用的檢測(cè)方法有放射免疫法、酶聯(lián)免疫吸附法等，這些方法對(duì)檢測(cè)的靈敏度都有所提高，但操作麻煩，費(fèi)時(shí)費(fèi)力。為克服以上傳統(tǒng)分析方法的弊端，本發(fā)明設(shè)計(jì)了一種操作簡(jiǎn)單快速、靈敏度高的電化學(xué)發(fā)光免疫傳感器，從而建立高靈敏度、方便、快速的檢測(cè)體系，為臨床診治的普及提供支持。

電化學(xué)發(fā)光（ECL）是由電化學(xué)反應(yīng)直接或間接引發(fā)的化學(xué)發(fā)光現(xiàn)象，作為電化學(xué)和化學(xué)發(fā)光互相交叉滲透的產(chǎn)物，該方法既有發(fā)光分析的超高靈敏度，又結(jié)合了電化學(xué)電位可控的優(yōu)點(diǎn)，所以引起了分析化學(xué)和生物分析等諸多領(lǐng)域的高度重視。目前用于檢測(cè)CYFRA 21-1的電化學(xué)發(fā)光免疫傳感器大多是基于夾心型免疫傳感策略，該傳感策略標(biāo)記步驟復(fù)雜、實(shí)驗(yàn)成本高且耗時(shí)長(zhǎng)。基于此，本發(fā)明設(shè)計(jì)了一種檢測(cè)CYFRA 21-1的無(wú)標(biāo)型電化學(xué)發(fā)光傳感器，該傳感器具有操作簡(jiǎn)單、響應(yīng)迅速、成本較低等優(yōu)點(diǎn)。

傳統(tǒng)電化學(xué)發(fā)光材料如魯米諾、三聯(lián)吡啶釕等具有固定困難、發(fā)光信號(hào)不穩(wěn)定等缺點(diǎn)。因此，本發(fā)明制備了一種銅摻雜的Tb基MOF，該材料能夠產(chǎn)生強(qiáng)而穩(wěn)定的電化學(xué)發(fā)光信號(hào)且易于固定在電極表面。在本發(fā)明中，與Tb基MOF相比，該銅摻雜的Tb基MOF具有更大的比表面積和更穩(wěn)定的電化學(xué)發(fā)光信號(hào)。AuPdPt納米花具有良好的導(dǎo)電性與催化活性，將其與該銅摻雜的Tb基MOF復(fù)合后提高了該材料的導(dǎo)電性與生物相容性，進(jìn)一步放大了電化學(xué)發(fā)光信號(hào)。本發(fā)明將銅摻雜的Tb基MOF作為發(fā)光材料和傳感界面，構(gòu)建了一種無(wú)標(biāo)型電化學(xué)發(fā)光免疫傳感器，實(shí)現(xiàn)了對(duì)CYFRA 21-1的靈敏檢測(cè)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的之一是合成銅摻雜的Tb基MOF并將其作為電化學(xué)發(fā)光材料。Tb基MOF呈光滑的球狀，具有較大的比表面積，銅的摻雜使其表面變粗糙，比表面積進(jìn)一步增大，同時(shí)電化學(xué)發(fā)光信號(hào)增強(qiáng)。

本發(fā)明的目的之二是合成AuPdPt納米花并使其與銅摻雜的Tb基MOF復(fù)合，AuPdPt納米花能夠提高Tb基MOF的導(dǎo)電性，并且能夠通過(guò)Au-NH₂鍵與抗體相連接，同時(shí)貴金屬納米花具有催化活性，能夠進(jìn)一步放大電化學(xué)發(fā)光信號(hào)。

本發(fā)明的目的之三是提供一種簡(jiǎn)單易行的CYFRA 21-1傳感器的制備方法。將銅摻雜的Tb基MOF作為發(fā)光材料和傳感界面，不需要復(fù)雜繁瑣的標(biāo)記技術(shù)，即可實(shí)現(xiàn)對(duì)CYFRA21-1的快速靈敏檢測(cè)。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：