[發明專利]用于檢測IgG4的組合物、試劑盒、應用及檢測方法

有效

• 申請號: 202010638192.4
• 申請日: 2020-07-01
• 公開（公告）號: CN111707835B
• 公開（公告）日: 2022-11-11
• 發明（設計）人: 錢鵬;曾敏霞;鄧京
• 申請（專利權）人: 珠海麗珠試劑股份有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/58;G01N33/543
• 代理公司: 北京超成律師事務所 11646
• 代理人: 高玉光

1.一種用于檢測樣本中IgG4的組合物，其特征在于，所述組合物包括：對樣本中IgG4抗原具有特異性的鼠抗人IgG4單克隆抗體，鼠抗人IgG4單克隆抗體包被的甲苯磺酰基磁珠溶液，抗體包被量為10ug抗體/mg磁珠，甲苯磺酰基磁珠的濃度為0.1-0.6 mg/ml；偶聯有堿性磷酸酶的對樣本中IgG4抗原具有特異性的鼠抗人IgG4單克隆抗體的溶液，抗體的濃度為0.1-1μg/ml；含有1U/ml木瓜蛋白酶、1% 牛血清白蛋白、0.1% Procline-300的0.01 MpH7.4磷酸鹽緩沖液的樣本稀釋液a；含有1% 牛血清白蛋白、0.1% Procline-300的0.01 MpH7.4磷酸鹽緩沖液的樣本稀釋液b和AMPPD；

所述樣本稀釋液b完全稀釋所述樣本稀釋液a后的蛋白水解酶濃度為M，所述樣本稀釋液a中蛋白水解酶稀釋前的濃度為N，其中滿足：M≤0.5%N。

2.一種用于檢測IgG4的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括權利要求1所述的用于檢測IgG4的組合物。

3.一種非診斷目的用于檢測IgG4的檢測方法，其特征在于：

所述檢測方法使用權利要求1所述的組合物或權利要求2所述試劑盒，所述檢測方法包括，

加樣：將樣本放入樣本稀釋液a中；

稀釋：將一定量的經加樣步驟產生的含有樣本的樣本稀釋液a通過含有可將蛋白水解酶濃度稀釋至不影響Fc片段與第一抗體和第二抗體結合的緩沖液的樣本稀釋液b稀釋；

其中所述第一抗體為對樣本中IgG4具有特異性的IgG4抗體；所述第二抗體為對所述樣本中IgG4具有特異性的抗體；

孵育：將所述樣本與所述第一抗體包被的納米磁微粒溶液孵育；

清洗：清洗納米磁微粒；

再孵育：再將包括偶聯有酶的所述第二抗體的酶結合液加入清洗后的納米磁微粒溶液中孵育；

再清洗：清洗納米磁微粒；

發光：最后向清洗后的納米磁微粒溶液中加入酶促發光底物，測定發光值，發光值可定量分析IgG4含量；

在稀釋步驟完成時，所述樣本稀釋液b完全稀釋所述樣本稀釋液a后的蛋白水解酶濃度為M，所述樣本稀釋液a中蛋白水解酶稀釋前的濃度為N，其中滿足：M≤0.5%N。