[發明專利]新冠病毒抗體檢測試紙條、試劑盒及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202010637071.8
• 申請日: 2020-07-03
• 公開（公告）號: CN113884681A
• 公開（公告）日: 2022-01-04
• 發明（設計）人: 田克恭;鄧均華;譚菲菲
• 申請（專利權）人: 洛陽普泰生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/569;G01N33/558;G01N33/58;G01N33/531
• 代理公司: 北京聿宏知識產權代理有限公司 11372
• 代理人: 吳大建;康志梅

本發明提供了一種新冠病毒抗體檢測試紙條、試劑盒及其制備方法和應用。本發明提供的新冠病毒抗體檢測試紙條包括底板，所述底板上依次有樣品墊、金標墊、硝酸纖維素膜和吸水墊，所述金標墊上含有膠體金標記的新冠病毒重組蛋白S1；所述硝酸纖維素膜上包括檢測線和質控線，所述檢測線上固定化有新冠病毒重組蛋白S1，所述質控線上固定化有新冠病毒陽性血清；其中，所述新冠病毒重組蛋白S1為SEQ ID No.1所示的核苷酸序列編碼的蛋白。本發明提供的新冠病毒抗體檢測試紙條與樣品稀釋液組裝成試劑盒可用于檢測不同動物的血清，還可用于新冠病毒溯源檢測、新冠病毒動物感染模型研究、藥物篩選和疫苗評價等。

技術領域

本發明屬于生物醫藥領域，具體涉及一種新冠病毒抗體檢測試紙條、試劑盒 及其制備方法和應用。

背景技術

冠狀病毒(Coronaviridae)屬于冠狀病毒科冠狀病毒屬。冠狀病毒屬的病毒 是具外套膜的正鏈單股RNA病毒，直徑約80-120nm，其遺傳物質是所有RNA 病毒中最大的，感染宿主范圍寬，可感染人、鼠、豬、貓、犬、禽類脊椎動物。 冠狀病毒的一個變種是引起非典型肺炎的病原體，屬于RNA病毒。

2020年2月29日，中國和世界衛生組織共同發布了《新型冠狀病毒肺炎 (COVID-19)聯合考察報告》，該報告明確指出“新冠肺炎病毒是一種動物源性 病毒，但中間宿主尚未查明”。盡快追溯新冠病毒的自然宿主和中間宿主，從源 頭上采取針對性的防控措施，乃當務之急，更具長遠意義。

因此，針對新冠病毒溯源及其傳播途徑的研究，當前迫切需要可用于不同動 物血清中新冠病毒抗體的高通量檢測方法和試劑，以解決不同動物溯源的問題。

本發明技術人員在試紙條制備過程中發現，不同動物來源血清的基質不一樣， 導致檢測結果存在假陽性，考慮研制一種樣品稀釋液，以消除不同動物血清中基 質的影響，提高檢測的準確度。

發明內容

為了解決現有技術的不足，本發明提供了一種基于雙抗原夾心原理制備的新 冠病毒抗體檢測試紙條，以及該試紙條與特制的樣品稀釋液組裝而成的新冠病毒 抗體檢測試劑盒。

本發明的第一方面提供了一種新冠病毒抗體檢測試紙條，其包括底板，所述 底板上依次有樣品墊、金標墊、硝酸纖維素膜和吸水墊，所述金標墊上含有膠體 金標記的新冠病毒重組蛋白S1；所述硝酸纖維素膜上包括檢測線和質控線，所 述檢測線上固定化有新冠病毒重組蛋白S1，所述質控線上固定化有新冠病毒陽 性血清；其中，所述新冠病毒重組蛋白S1為SEQ ID No.1所示的核苷酸序列編 碼的蛋白。

根據本發明的一些實施方式，所述新冠病毒抗體檢測試紙條包括底板，所述 底板具有第一端和第二端，并且沿所述第一端向第二端的方向上依次有樣品墊、 金標墊、硝酸纖維素膜和吸水墊，所述硝酸纖維素膜與金標墊接觸或與樣品墊、 金標墊接觸使得新冠病毒抗體與新冠病毒重組蛋白S1的結合體能在其上向底板 第二端遷移。

根據本發明的一些實施方式，所述膠體金標記的新冠病毒重組蛋白S1的量 為5-35μg/ml，例如可以為5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、16、17、 18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35μg/ml。

根據本發明的優選實施方式，所述膠體金標記的新冠病毒重組蛋白S1的量 優選為10-20μg/ml。

根據本發明的優選實施方式，所述膠體金標記的新冠病毒重組蛋白S1的量 優選為10-15μg/ml。

根據本發明的一些實施方式，所述金標墊上的所述含有膠體金標記的新冠病 毒重組蛋白S1的量為12.5-100μg/ml。

根據本發明的優選實施方式，所述金標墊上的所述含有膠體金標記的新冠病 毒重組蛋白S1的量為20μg/ml。