[發明專利]新冠病毒抗體檢測試紙條、試劑盒及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202010637071.8
• 申請日: 2020-07-03
• 公開（公告）號: CN113884681A
• 公開（公告）日: 2022-01-04
• 發明（設計）人: 田克恭;鄧均華;譚菲菲
• 申請（專利權）人: 洛陽普泰生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/569;G01N33/558;G01N33/58;G01N33/531
• 代理公司: 北京聿宏知識產權代理有限公司 11372
• 代理人: 吳大建;康志梅

1.一種新冠病毒抗體檢測試紙條，其包括底板，所述底板上依次有樣品墊、金標墊、硝酸纖維素膜和吸水墊，所述金標墊上含有膠體金標記的新冠病毒重組蛋白S1；所述硝酸纖維素膜上包括檢測線和質控線，所述檢測線上固定化有新冠病毒重組蛋白S1，所述質控線上固定化有新冠病毒陽性血清；其中，所述新冠病毒重組蛋白S1為SEQ ID No.1所示的核苷酸序列編碼的蛋白。

2.根據權利要求1所述的試紙條，其特征在于，所述膠體金標記的新冠病毒重組蛋白S1的量為5-35μg/ml，優選為10-20μg/ml；和/或

所述金標墊上的所述含有膠體金標記的新冠病毒重組蛋白S1的量為12.5-100μg/ml，優選為15-50μg/ml，更優選為20μg/ml；和/或

所述檢測線上固定的所述新冠病毒重組蛋白S1的量為0.4-2.5mg/ml，優選為0.8-1.6mg/ml；和/或

所述質控線上固定的所述新冠病毒陽性血清的量為0.5-3.0mg/ml，優選為1.0-3.0mg/ml。

3.一種樣品稀釋液，其包括磷酸鹽緩沖液、酪蛋白、EDTA、蔗糖和防腐劑。

4.根據權利要求3所述的樣品稀釋液，其特征在于，所述樣品稀釋液包括0.05-0.15mol/L PBS緩沖液、0.5％-2.0％w/v酪蛋白、0.3％-1.0％w/v EDTA、0.5％-2.5％w/v蔗糖和0.05-0.2％v/v防腐劑；優選地，所述樣品稀釋液包括0.08-0.12mol/L PBS緩沖液、0.5％-1.5％w/v酪蛋白、0.5％-0.8％w/v EDTA、0.8％-1.5％w/v蔗糖和0.08-0.15％v/v防腐劑；和/或

所述PBS緩沖液的pH為7.0-8.0，優選為7.2-7.6；和/或

所述防腐劑選自NaN₃和/或Proclin300，優選選自Proclin300。

5.根據權利要求3或4所述的樣品稀釋液，其特征在于，所述樣品稀釋液包括pH 7.4的0.1M PBS、0.5％-2.0％w/v酪蛋白、0.5％w/v EDTA、0.8％-2.5％w/v蔗糖、0.1％V/VProclin300；

優選地，所述樣品稀釋液包括pH 7.4的0.1M PBS、1％w/v酪蛋白、0.5％w/v EDTA、1％w/v蔗糖和0.1％V/V Proclin300，或pH 7.4的0.1M PBS、0.8％w/v酪蛋白、0.5％w/v EDTA、1％w/v蔗糖和0.1％V/V Proclin300，或pH 7.4的0.1M PBS、0.8％w/v酪蛋白、0.5％w/vEDTA、0.8％w/v蔗糖和0.1％V/V Proclin300。

6.一種新冠病毒抗體檢測試劑盒，其包括權利要求1或2所述的新冠病毒抗體檢測試紙條和/或根據權利要求3-5中任一項所述的樣品稀釋液。

7.一種新冠病毒抗體檢測試劑盒的制備方法，其包括：

步驟S1：用基因工程手段制備SEQ ID No.1編碼的新冠病毒重組蛋白S1，經膠體金標記所述新冠病毒重組蛋白S1為金標新冠病毒重組蛋白S1，制成金標墊；

步驟S2：固定所述新冠病毒重組蛋白S1、新冠病毒陽性血清分別吸附于硝酸纖維素膜的兩端作為檢測線、質控線；

步驟S3：將樣品墊、步驟S1制備的所述金標墊、步驟S2制備的所述硝酸纖維素膜、吸水紙依次粘貼在底板上，制成新冠病毒抗體檢測試紙條；

步驟S4：配制樣品稀釋液，與步驟S3制備的所述新冠病毒抗體檢測試紙條組裝成試劑盒。