[發明專利]一種用于血液分析的溶血素及其制備方法、試劑

在審

• 申請號: 202010635808.2
• 申請日: 2020-07-03
• 公開（公告）號: CN111781047A
• 公開（公告）日: 2020-10-16
• 發明（設計）人: 李忠亮
• 申請（專利權）人: 四川恒健生物科技有限公司
• 主分類號: G01N1/30
• 分類號: G01N1/30;G01N15/14;G01N33/50
• 代理公司: 成都佳劃信知識產權代理有限公司 51266
• 代理人: 任遠高

本發明公開了一種用于血液分析的溶血素及其制備方法、試劑，包括十八烷基硫酸鈉、乙醇、檸檬酸、氯化鈉、氯化鉀和碳酸氫鈉，通過以上技術方案，本發明達到了制備簡單、檢測精度高及適用范圍廣的有益效果。

技術領域

本發明涉及血液分析技術領域，尤其是一種用于血液分析的溶血素及其制備方法、試劑。

背景技術

血細胞分析對于開展科學研究，疾病的預防、診斷和治療有著重要的價值，從最初研究細胞的形態、大小、數量到最近的細胞表面的抗原成分。傳統的細胞免疫和非特異性免疫功能檢測技術，不能從單細胞水平對靶細胞的大小、形態、質膜和細胞內部結構進行多參數，高靈敏度的分析，流式細胞儀可以快速測量、分選、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理、生物化學方面的特征參量，并可以根據預選的參量范圍把指定的細胞亞群從中分選出來，目前應用于免疫學、血液學、腫瘤學、細胞遺傳學、細胞生物學、生物化學等臨床醫學和基礎醫學研究領域，如細胞表面分子的淋巴細胞及其亞群分析、細胞內細胞因子分析、白血病免疫分型、腫瘤耐藥相關蛋白分析、自身免疫性疾病相關HLA抗原分析、移植免疫中的交叉配型、線粒體膜電位、細胞凋亡、細胞內鈣離子濃度、中性粒細胞功能分析等。

由于體內發揮免疫功能的多數為白細胞，而人類血液中含量最多的是紅細胞，為了減少對靶細胞分析影響，需要剔除血液中紅細胞的干擾作用，在進行紅細胞溶血時要避免破壞白細胞的結構和功能，保留白細胞表面的膜蛋白，因此，對溶血的要求非常高，現有的流式細胞用于血液分析的溶血素多為低滲用于血液分析的溶血素，即低于滲透壓的溶液，等滲液用于血液分析的溶血素是與滲透壓相等的溶液，以前認為紅細胞在等滲溶液中，能保持其正常形態(不皺縮、不溶血)，但有的分子還能夠自由通過細胞膜，使紅細胞溶血，它們都是利用細胞內外滲透壓差異而導致細胞膜破裂，通過改變紅細胞的物理結構實現溶血反應。一些化學物質如藥物、細菌毒素、蛇毒等，與紅細胞中的亞鐵血紅蛋白結合，變成高鐵血紅蛋白，使紅細胞結構發生改變，導致溶血反應。

目前我國使用的用于血液分析的溶血素多為進口原裝試劑、存在著成本高、購買渠道繁瑣等弊端，無法及時滿足國內醫院的正常使用，并且用于血液分析的溶血素的配方和儀器有一定的關系，不同的儀器使用不同的用于血液分析的溶血素，同一用于血液分析的溶血素在不同儀器上顯示的效果不一，主因是用于血液分析的溶血素裂解后的白細胞形態有差異，再結合FSC/SSC的光路設計會導致淋巴、單核、粒細胞分群的差異。目前市面上許多用于血液分析的溶血素只適合某一類流式細胞儀，不能達到一種溶血素通用多類流式細胞儀的作用。

因此，本發明公開了一種制備簡單、檢測精度高及適用范圍廣的用于血液分析的溶血素及其制備方法、試劑。

發明內容

針對上述問題，本發明的目的在于提供一種用于血液分析的溶血素及其制備方法、試劑，本發明采用的技術方案如下：

一種用于血液分析的溶血素，每升所述的用于血液分析的溶血素包括以下組分：十八烷基硫酸鈉0.5～1.5g、乙醇0.02～0.09g、檸檬酸2～3g、氯化鈉1～10g、氯化鉀5.1～5.5g、碳酸氫鈉0.1×10^-3～0.9×10^-3g。

進一步地，每升所述的用于血液分析的溶血素包括以下組分：十八烷基硫酸鈉0.8～1.5g、乙醇0.04～0.09g、檸檬酸2.5～3g、氯化鈉3～10g、氯化鉀5.2～5.5g、碳酸氫鈉0.3×10^-3～0.9×10^-3g。

進一步地，每升所述的用于血液分析的溶血素包括以下組分：十八烷基硫酸鈉1.0～1.5g、乙醇0.06～0.09g、檸檬酸2.8～3g、氯化鈉7～10g、氯化鉀5.4～5.5g、碳酸氫鈉0.6×10^-3～0.9×10^-3g。