[發明專利]一種香豆素類熒光衍生試劑的設計合成及其在氟蟲腈檢測中的應用

有效

• 申請號: 202010633517.X
• 申請日: 2020-07-02
• 公開（公告）號: CN111574485B
• 公開（公告）日: 2022-03-25
• 發明（設計）人: 尹忠平;劉佳;彭大勇;上官新晨;陳繼光;李冬文;張清峰;吳少福
• 申請（專利權）人: 江西農業大學
• 主分類號: C07D311/16
• 分類號: C07D311/16;C09K11/06;G01N30/06;G01N21/64
• 代理公司: 南昌金軒知識產權代理有限公司 36129
• 代理人: 牛永山

本發明涉及食品和農業安全檢測領域，具體涉及一種結構新穎的香豆素類熒光衍生試劑的設計合成及其在氟蟲腈檢測中的應用。經試驗證明，本發明所設計合成的香豆素類熒光衍生試劑，具有很強的熒光強度，基于該衍生試劑所建立的柱前衍生化測定氟蟲腈的HPLC?FLD方法靈敏度高、檢測限和定量限低、穩定性和重現性好，將該方法應用于雞蛋中殘留氟蟲腈的檢測，結果準確、可靠，優于目前報道的HPLC?MS/MS、GC?MS方法。本發明所設計合成的香豆素類熒光衍生試劑性能優良，基于其所建立的氟蟲腈柱前衍生化檢測方法靈敏、可靠、準確，具有很好的應用前景。

技術領域

本發明涉及食品和農業安全檢測領域，具體涉及一種香豆素類熒光衍生試劑的設計合成及其在氟蟲腈檢測中的應用。

背景技術

2017年，歐洲多國市場上相繼發現了氟蟲腈含量超標的“毒雞蛋”，此次“毒雞蛋”事件波及到了世界多個國家和地區，韓國和我國臺灣、香港等地區也相繼發現該“問題雞蛋”。“毒雞蛋”事件引起人們對食品安全的高度關注，并以此敲響預防、控制氟蟲腈殘留超標的警鐘。高靈敏度、高準確性的檢測技術是保證高標準限量監控工作順利進行的基礎，因此，氟蟲腈殘留檢測的研究備受關注。

氟蟲腈，中文商品名稱為：銳勁特，是普朗克公司(法國)研制的一種殺蟲效果良好的高活性殺蟲劑，于1993年投入市場，被廣泛應用于農業病蟲害的防治。該殺蟲劑的作用機理為：通過害蟲體內一種抑制性神經遞質-GABA(γ-氨基丁酸)調節的氯通道干擾氯離子進出的通路，破壞中樞神經系統的活性并造成害蟲死亡。但氟蟲腈易殘留，在自然界中難降解，對環境不利，因此對其進行檢測和控制是很有必要的。

目前，食品中氟蟲腈及其代謝物的檢測方法有高效液相色譜法(HPLC)、高效液相色譜-串聯質譜法(HPLC-MS/MS)、氣相色譜法(GC)以及氣相色譜-質譜聯用法(GC-MS)，上述檢測方法各有優缺點，但也存在一定的不足，如樣品測前處理復雜、檢驗成本高、需要借助昂貴、精密的儀器、操作較為繁瑣等不足。因此，開發一種較為穩定、靈敏、選擇性強且干擾小的檢測方法很有必要。

氟蟲腈分子結構中吡唑環5位游離的氨基容易被修飾，針對該基團通過與特定的熒光衍生試劑進行衍生化反應，生成含有熒光發光基團的氟蟲腈衍生物，從而建立氟蟲腈殘留的熒光檢測方法，通過增強所接入熒光體的熒光強度提高熒光檢測的靈敏度和檢測限是可行的。

本發明基于上述分析，合成了熒光較強、結構新穎的香豆素類熒光衍生試劑，在此基礎上研究了氟蟲腈熒光衍生化反應體系，建立了氟蟲腈HPLC-FLD檢測方法，從根本上提升了氟蟲腈熒光檢測的靈敏度和穩定性，實現了對氟蟲腈高靈敏度定量檢測這一目標，為雞蛋中氟蟲腈及其代謝物殘留檢測與控制提供了合理、有效的方法。

發明內容

本發明的目的在于提供一種結構新穎的香豆素類熒光衍生試劑7-(二乙氨基)-2-氧-2H-色酮-3-羧酸，并提供該香豆素類熒光衍生試劑的制備方法，其是以4-(二乙氨基)水楊醛為主要原料，通過化學合成制備得到。本發明還提供了基于上述香豆素類熒光衍生試劑所建立的柱前衍生化檢測氟蟲腈的HPLC-FLD方法。由于本發明所設計合成的香豆素類熒光衍生試劑性能優良，基于其所建立的氟蟲腈柱前衍生化檢測方法靈敏、可靠、準確，因此具有很好的應用前景。

本發明的上述目的通過以下技術方案來實現：

本發明提供一種具有式(I)結構的香豆素類熒光衍生試劑L1：

本發明還提供一種制備上述香豆素類熒光衍生試劑的方法，包括以下步驟：

(1)縮合成環：將式(II)化合物與丙二酸二乙酯進行反應得到中間體式(Ⅲ)化合物，反應式如下：

(2)水解：中間體式(Ⅲ)化合物與氫氧化鈉反應得到式(I)化合物，反應式如下：