[發明專利]一種從大白菜商品雜交種中篩選純合材料的方法

在審

• 申請號: 202010632711.6
• 申請日: 2020-07-02
• 公開（公告）號: CN111647651A
• 公開（公告）日: 2020-09-11
• 發明（設計）人: 魏小春;張曉偉;原玉香;趙艷艷;王志勇;楊雙娟;李林;牛劉靜
• 申請（專利權）人: 河南省農業科學院園藝研究所
• 主分類號: C12Q1/686
• 分類號: C12Q1/686;C12Q1/6895
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 呂紀濤

本發明提供了一種從大白菜商品雜交種中篩選純合材料的方法，屬于大白菜育種技術領域，所述方法包括：以大白菜商品雜交種基因組DNA為模板，分別以Class I引物對、Class II引物對進行PCR擴增獲得擴增產物；根據擴增產物的電泳結果確定所述大白菜商品雜交種的親本類型；當親本分別為I類S單元和II類S單元時，篩選以Class I引物對和Class II引物對分別為引物擴增后的擴增產物中只有一個出現條帶的材料為純合親本；當親本同時為I類S單元或同時為II類S單元時，用限制性內切酶Hinf I或Alu I進行酶切，篩選酶切產物中電泳條帶的帶型顯著不一致的材料為疑似純合材料。

技術領域

本發明屬于大白菜育種技術領域，尤其涉及一種從大白菜商品雜交種中篩選純合材料的方法。

背景技術

自交不親和性(Self-incompatibility)是指兩性花植物，雌雄性器官正常，在不同基因型的株間授粉能正常結籽，但是花期自交不能結籽或者結籽率極低的特性。自交不親和性普遍存在于顯花植物中，是防止植物近親繁殖、保持遺傳變異的一種重要的遺傳機制(Takayama,S.,andIsogai,A.(2005).Self-incompatibility in plants.Annu RevPlant Biol 56,467-489.)。自然界中大約有一半以上的顯花植物都具有自交不親和性，其中包括70多個科、250多個屬(DeNettancourt,D.(1977).Incompatibility inangiosperms(Berlin；New York:Springer-Verlag).)。

自交不親和系是雜種優勢利用的主要途徑之一。在十字花科蔬菜育種實踐中，如果雙親都是自交不親和系，利用父本、母本都是自交不親和系來制種，其正反交的種子幾乎可得到100％雜種。如果利用父本、母本有一方是自交不親和系來制種，用自交不親和系做母本，不去雄，便可與另一自交親和的品種(系)雜交，獲得雜交種子。因而，在雜交制種時，可免除去雄工序，減少工作量，降低制種成本，有利于雜交種的廣泛應用。

蕓薹屬植物屬于典型的孢子體型自交不親和體系，該體系在遺傳上由一個具有復等位基因的高度多態性的S位點控制(Bateman,A.J.(1955).Self-incompatibilitysystems in angiosperms:III.Cruciferae.Heredity9,53-68.；Thompson,K.F.(1957).Self-incompatibility in marrow-stem kale,Brassica oleracea var.acephalaI.Demonstration of a sporophytic system.Journal of Genetics 55,45-60.)。在一個S位點上包含多個S等位基因，編碼雌、雄S決定因子的基因均在S位點上，二者共同存在于一個分離的單元內，因此，每一個S位點又被稱為一個“S單元型”(Shaplotype)(Nasrallahand Nasrallah,1993)。根據S位點基因序列的相似性，可將蕓薹屬自交不親和等位基因分為兩大類：Ⅰ類和Ⅱ類(Nasrallah,J.B.,and Nasrallah,M.E.(1993).Pollen-stigmasignaling in the sporophytic self-incompatibility response.Plant Cell5,1325-1335.)。在花粉中，Ⅰ類S單元型對Ⅱ類單元型均表現為顯性(Hatakeyama,Watanabe,Takasaki,Ojima,and Hinata(1998).Dominance relationships between S-alleles inself-incompatible Brassica campestrisL.Heredity80,241-247.)。Ⅰ類S單元型具有較強的自交不親和性，而Ⅱ類S單元型的具有一定的自交親和性。