[發明專利]南極魚hepcidin抗菌肽及其制備方法和應用有效
| 申請號： | 202010631720.3 | 申請日： | 2020-07-03 |
| 公開（公告）號： | CN111662370B | 公開（公告）日： | 2022-07-26 |
| 發明（設計）人： | 陳良標;劉明麗;許強華;胡瑞芹;盧玉平;翟萬營 | 申請（專利權）人： | 上海海洋大學 |
| 主分類號： | C07K14/46 | 分類號： | C07K14/46;C12N15/12;C12N1/21;C12N15/70;A61P31/04;C12R1/19 |
| 代理公司： | 上海伯瑞杰知識產權代理有限公司 31227 | 代理人： | 周一新 |
| 地址： | 201306 上*** | 國省代碼： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 南極 hepcidin 抗菌 及其 制備 方法 應用 | ||
1.一種南極魚hepcidin抗菌肽組合物，其特征在于，包括兩種來源于鱗頭犬牙南極魚(
所述抗菌肽Dmhep_8cysV1的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示；
所述抗菌肽Dmhep_8cysV2的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。
2.根據權利要求1所述的南極魚hepcidin抗菌肽組合物，其特征在于，所述抗菌肽Dmhep_8cysV1和所述抗菌肽Dmhep_8cysV2中，具有抗菌活性的抗菌肽均來源于鱗頭犬牙南極魚(
3.根據權利要求2所述的南極魚hepcidin抗菌肽組合物，其特征在于，編碼氨基酸序列如SEQ ID NO:3所示的hepcidin抗菌肽基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示；編碼氨基酸序列如SEQ ID NO:4所示的hepcidin抗菌肽基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:6所示。
4.根據權利要求1所述的南極魚hepcidin抗菌肽組合物，其特征在于，
所述抗菌肽Dmhep_8cysV1如SEQ ID NO:1所示的氨基酸序列的N端可連接或序列作為標簽；
所述抗菌肽Dmhep_8cysV2如SEQ ID NO:2所示的氨基酸序列的N端可連接或序列作為標簽。
5.權利要求1至4任一項所述南極魚hepcidin抗菌肽組合物的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
（1）用RT-PCR的方法從鱗頭犬牙南極魚的肝臟組織中得到其編碼區序列，分別得到核苷酸序列如SEQ ID NO:5和SEQ ID NO:6所示的南極魚hepcidin抗菌肽基因；
（2）將上述南極魚hepcidin抗菌肽基因分別插入到原核表達載體中，構成重組質粒；
（3）將重組質粒轉入克隆用大腸桿菌菌株中轉化宿主細胞，并對宿主細胞進行誘導表達，獲得表達產物；
（4）分離純化上述表達產物，分別命名為抗菌肽Dmhep_8cysV1和抗菌肽Dmhep_8cysV2。
6.權利要求1至4任一項所述南極魚hepcidin抗菌肽組合物在制備抑制細菌生長的制劑中的應用，
所述抗菌肽Dmhep_8cysV1用于抑制大腸桿菌、鏈球菌、嗜水氣單胞菌、金黃色葡萄球菌生長；
所述抗菌肽Dmhep_8cysV2用于抑制大腸桿菌、鏈球菌、嗜水氣單胞菌、愛德華氏菌、金黃色葡萄球菌生長。
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