[發明專利]一種基于連續流動分析儀測定煙草中總黃酮含量的方法

在審

• 申請號: 202010625802.7
• 申請日: 2020-07-01
• 公開（公告）號: CN111812047A
• 公開（公告）日: 2020-10-23
• 發明（設計）人: 王春瓊;曾彥波;彭麗娟;陳丹;張燕;李苓;曾天寶;蔡潔云;楊藝敏;張慶剛
• 申請（專利權）人: 云南省煙草質量監督檢測站
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N21/05
• 代理公司: 昆明協立知識產權代理事務所(普通合伙) 53108
• 代理人: 謝嘉

本發明公開了一種基于連續流動分析儀測定煙草中總黃酮含量的方法。采用連續流動分析儀在510nm波長處檢測，以亞硝酸鈉?硝酸鋁作為顯色劑，并配制氫氧化鈉溶液，標準工作曲線方程為y＝0.0022x+0.0017，相關系數r²＝0.9998，將樣品溶液所對應的總黃酮儀器測定值代入公式計算，即可得到待測煙草中的總黃酮含量。本發明首次將連續流動分析儀應用于煙草中總黃酮含量的測定。該方法的回收率在96.83％～104.4％之間；5個樣品在不同時間、不同批次檢測的變異系數均小于5％；檢出限和定量限分別為0.025mg/g和0.082mg/g。本發明操作簡便、分析速度快，重復性、穩定性和準確性均較好，具有良好的應用前景。

技術領域

本發明屬于煙草理化指標檢測技術領域，具體是涉及一種基于連續流動分析儀對煙草中總黃酮含量進行快速準確測定的方法。

背景技術

煙草作為我國重要的經濟作物，近年來，隨著中國簽署《煙草控制框架公約》，意味著煙草的發展空間受到了很大的限制，使得生產優質煙葉，降低有害成分，提高煙草產品的品質，成為現階段一個重要的課題。煙草的生長發育和煙葉的品質受溫度、海拔、光照、土壤、水分等多種因素的影響，目前黃酮類化合物已被證實是影響煙草品質重要的潛香型物質，其代謝受多種因素調控。因此研究黃酮類化合物代謝途徑及其調節機制對提高煙葉品質具有重要意義，故煙草中總黃酮含量的準確測定顯得極其重要。

已報道用于總黃酮化合物含量測定的方法主要為高效液相色譜法，但該方法使用的設備昂貴、檢測成本高、檢測周期長，而且需要專業人士操作，因此難以普及。

連續流動分析儀不僅設備便宜、維護成本低，且具有前處理簡單、上機操作簡便、檢測速度快、定量準確、重現性好等優勢，在檢測中不需要使用有機試劑，對環境更友好。我國煙草行業自上世紀八十年代引進連續流動分析儀以來，已進行了煙草及煙草制品中水溶性糖、總植物堿、總氮、總揮發酸、淀粉、游離態煙堿等化學成分的檢測，也有采用連續流動分析儀進行卷煙紙中氯、鉀、硝酸鹽等的檢測，但目前還未見有運用連續流動分析儀檢測煙草中總黃酮含量的報道。

發明內容

本發明的目的在于針對現有技術的不足，提供一種基于連續流動分析儀實現的，快速、簡便、精確度高的測定煙草中總黃酮含量的方法。

本發明的目的通過以下技術方案予以實現。

除非另有說明，本發明所采用的百分數均為質量百分數。

一種基于連續流動分析儀測定煙草中總黃酮含量的方法，具體采用以下步驟：

(1)準確稱取1.0g煙末置于150mL具塞三角瓶中，加入80％乙醇溶液100mL，搖勻后蓋緊塞子放在振搖器上，以150r/min振蕩萃取30min，用定性濾紙過濾萃取液，收集濾液作為樣品溶液備用；

(2)用連續流動分析儀分析：

①配制亞硝酸鈉試劑：稱取亞硝酸鈉5.00g，用800mL去離子水溶解，然后定容至1000mL；

②配制硝酸鋁試劑：稱取10.00g硝酸鋁，用800mL去離子水溶解，然后定容至1000mL；

③配制氫氧化鈉試劑：稱取40.00g氫氧化鈉溶于800mL去離子水中，然后定容至1000mL；

④分析儀流路設置：樣品溶液用黃/黃泵管，流速為1.20mL/min；亞硝酸鈉試劑用黑/黑泵管，流速為0.32mL/min；硝酸鋁試劑用黑/黑泵管，流速為0.32mL/min；氫氧化鈉試劑用紅/紅泵管，流速為0.78mL/min；清洗液用紅/紅泵管，流速為0.78mL/min；氫氧化鈉試劑加入后，樣品溶液與三種試劑的混合物再經80匝反應混合圈充分混勻顯色后，進入檢測器；檢測波長：510nm；檢測速度：30個樣品/h；進樣/清洗時間比：1:1；基線校正：開通；漂移校正：開通；