[發明專利]一種基于連續流動分析儀測定煙草中總黃酮含量的方法

在審

• 申請號: 202010625802.7
• 申請日: 2020-07-01
• 公開（公告）號: CN111812047A
• 公開（公告）日: 2020-10-23
• 發明（設計）人: 王春瓊;曾彥波;彭麗娟;陳丹;張燕;李苓;曾天寶;蔡潔云;楊藝敏;張慶剛
• 申請（專利權）人: 云南省煙草質量監督檢測站
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31;G01N21/05
• 代理公司: 昆明協立知識產權代理事務所(普通合伙) 53108
• 代理人: 謝嘉

1.一種基于連續流動分析儀測定煙草中總黃酮含量的方法，具體采用以下步驟：

(1)準確稱取1.0g煙末置于150mL具塞三角瓶中，加入80％乙醇溶液100mL，搖勻后蓋緊塞子放在振搖器上，以150r/min振蕩萃取30min，用定性濾紙過濾萃取液，收集濾液作為樣品溶液備用；

(2)用連續流動分析儀分析：

①配制亞硝酸鈉試劑：稱取亞硝酸鈉5.00g，用800mL去離子水溶解，然后定容至1000mL；

②配制硝酸鋁試劑：稱取10.00g硝酸鋁，用800mL去離子水溶解，然后定容至1000mL；

③配制氫氧化鈉試劑：稱取40.00g氫氧化鈉溶于800mL去離子水中，然后定容至1000mL；

④分析儀流路設置：樣品溶液用黃/黃泵管，流速為1.20mL/min；亞硝酸鈉試劑用黑/黑泵管，流速為0.32mL/min；硝酸鋁試劑用黑/黑泵管，流速為0.32mL/min；氫氧化鈉試劑用紅/紅泵管，流速為0.78mL/min；清洗液用紅/紅泵管，流速為0.78mL/min；氫氧化鈉試劑加入后，樣品溶液與三種試劑的混合物再經80匝反應混合圈充分混勻顯色后進入檢測器；檢測波長：510nm；檢測速度：30個樣品/h；進樣/清洗時間比：1:1；基線校正：開通；漂移校正：開通；

(3)繪制標準工作曲線：準確稱取0.200g蘆丁于200mL乙醇中混合均勻，再用去離子水定容至1000mL，得到含量為200mg/L的總黃酮標準儲備液；用移液管分別移取10、30、50、70和90mL儲備液，分別用去離子水定容至100mL，分別得到20、60、100、140和180mg/L的標準工作液；標準工作曲線方程為：y＝0.0022x+0.0017，相關系數r²＝0.9998；

(4)結果計算：

將待測煙末樣品溶液所對應的總黃酮儀器測定值代入公式(1)計算，得到待測煙末中的總黃酮含量，并以兩次平行測定的平均值作為最終的測定結果；

式中：P—待測煙末中的總黃酮含量(mg/g)，C—樣品溶液所對應的總黃酮儀器測定值(mg/L)，V—萃取液體積(mL)，m—煙末樣品質量(g)。