[發明專利]一種定量麻痹性貝類毒素檢測試紙的制作方法及應用

有效

• 申請號: 202010623818.4
• 申請日: 2020-06-30
• 公開（公告）號: CN111781367B
• 公開（公告）日: 2023-05-12
• 發明（設計）人: 蘇捷;許旻;喬琨;劉智禹
• 申請（專利權）人: 福建省水產研究所（福建水產病害防治中心）
• 主分類號: G01N33/58
• 分類號: G01N33/58;G01N33/577;G01N33/558;G01N33/532;G01N33/531;G01N33/53
• 代理公司: 廈門南強之路專利事務所(普通合伙) 35200
• 代理人: 張素斌

一種定量麻痹性貝類毒素檢測試紙的制作方法及應用，首先將載體墊置于最底層，載體墊上鋪設硝酸纖維素膜，然后將樣品組合墊和吸水墊分別設置于硝酸纖維素膜的兩端，且樣品組合墊和吸水墊的一端分別與硝酸纖維素膜部分重疊，樣品組合墊的一端上方覆蓋有膠帶層，硝酸纖維素膜上的檢測線靠近樣品組合墊的一端，質控線靠近吸水墊的一端；所述檢測線包括T1線和T2線，分別由氨基端包被人工抗原和胍基端包被人工抗原形成，所述質控線由羊抗鼠二抗形成；所述樣品組合墊上噴有標記有膠體金的胍基端人工抗原制備單克隆抗體和氨基端人工抗原制備單克隆抗體。具有特異性好，靈敏度高，操作技術簡單的特點，符合產業化發展趨勢，具有廣泛推廣的潛力。

技術領域

本發明涉及生物檢測領域，尤其涉及一種定量麻痹性貝類毒素檢測試紙的制作方法及應用。

背景技術

麻痹性貝毒(paralytic?shellfish?poisoning，PSP)是全球分布最廣、危害最大的一類海洋生物毒素，主要由海洋中的單細胞甲藻產生，現已證實多種亞歷山大藻(Alexandrium)、鏈狀裸甲藻(Gymnodiniumcatenatum)和巴哈馬梨甲藻(Pyrodiniumbahamense)等可以產生麻痹性貝毒，貝類濾食有毒藻后，藻毒素在其體內積累，進而通過食物鏈的傳遞危害人類健康。PSP在弱酸和低溫條件下比較穩定，通常的烹調方法不能改變其結構及降低其毒性，主要污染濾食性貝類，污染的貝類被人類食用后，會產生四肢面部肌肉麻痹、頭痛惡心等癥狀，嚴重時可窒息死亡。

如下式為麻痹性貝毒的結構：

麻痹性貝類毒素根據R4基團的不同，可以分為4類，1)高毒性的氨基甲酸酯類毒素(Carbamate?toxins)，包括石房蛤毒素(saxitoxin,STX)、新石房蛤毒素(neo-saxitoxin,neo-STX)、膝溝藻毒素l～4(GTX1-4)；2)低毒性的N-磺基氨甲?；惗舅?N－suLfocarbamoyl?toxins),包括B1、B2、C1～C4；3)脫氨甲?；惗舅?decarbamoyltoxins)，包括dc?STX、dcneo?STX、dc?GTX1-4；4)脫氧脫氨甲酰基類毒素(deoxydecarbamoyl?toxins)，包括do?STX、do?GTX2、do?GTX3。根據國家標準(GB5009.213—2016食品安全國家標準貝類中麻痹性貝類毒素的測定)要求，PSP主要檢測的成分包括STX、GTX1,4、GTX2,3、dcGTX2,3、GTX5、neoSTX、dcSTX，貝類可以通過濾食性把赤潮藻內的毒素富集，并能轉化為STX的形式保存在體內，STX占麻痹性貝毒主要成份的80％以上。

我國是貝類養殖大國，近年來對部分海區貝類毒素的調查顯示，我國沿海從南到北均受到PSP污染。自20世紀70年代以來，隨著我國貝類養殖規模的不斷擴大，近岸水體富營養化水平的上升，有毒藻類數量增加，因誤食染毒貝類而引起的中毒事件也不斷增多。

由于PSP分布廣泛、危害嚴重，因此建立快速、靈敏、有效地毒素檢測方法顯得十分迫切。目前國內外上普遍使用的貝毒監測方法主要是生物小鼠法和高效液相色譜法(HPLC)，但生物法存在誤差性大、重現性差，且存在不能分析樣品中具體組分的缺點；而HPLC法能夠精確地測定毒素的種類和含量，但需要對樣品進行繁瑣的前處理和購買昂貴的設備。因此，海洋生物樣品中麻痹性貝毒的監測就受到了嚴重的限制。

發明內容

本發明的目的在于解決現有技術中的上述問題，提供一種定量麻痹性貝類毒素檢測試紙的制作方法及應用。

為達到上述目的，本發明采用如下技術方案：