[發明專利]一種高純度N-乙酰神經氨酸固體的制備工藝

在審

• 申請號: 202010621889.0
• 申請日: 2020-07-01
• 公開（公告）號: CN111606958A
• 公開（公告）日: 2020-09-01
• 發明（設計）人: 毋鴻江;劉曉鵬;李海濤
• 申請（專利權）人: 中科鴻基生物科技有限公司
• 主分類號: C07H1/06
• 分類號: C07H1/06;C07H7/033
• 代理公司: 太原達引擎專利代理事務所(特殊普通合伙) 14120
• 代理人: 朱世婷

本發明涉及一種高純度N?乙酰神經氨酸固體的制備工藝，屬于N?乙酰神經氨酸的純化技術領域，解決傳統冰醋酸結晶法制得的N?乙酰神經氨酸產品純度達不到99.5％以上、顏色發黃的技術問題。解決方案為：本發明通過工業色譜法制得N?乙酰神經氨酸粗品溶液，再經過調pH值、濃縮、結晶、溶劑洗滌、干燥，制得N?乙酰神經氨酸固體的純度可達到99.5％以上，白度99以上，滿足醫藥上對高純度N?乙酰神經氨酸的要求，采用本發明制得N?乙酰神經氨酸可直接用作標準品使用。

技術領域

本發明屬于N-乙酰神經氨酸的純化技術領域，具體涉及一種高純度N-乙酰神經氨酸固體的制備工藝。

背景技術

N-乙酰神經氨酸又稱唾液酸，是一系列含9個碳原子的羧基化單糖?；苌锏慕y稱，其系統命名為5-氨基-3,5-二脫氧-D-甘油-D-半乳壬酮糖。目前N-乙酰神經氨酸的制備方法主要有化學合成法、酶合成法、天然產物提取法和微生物發酵法等。

現有技術中，N-乙酰神經氨酸的純化常用的方法是冰醋酸結晶法。該法制備N-乙酰神經氨酸收率低，而且雜質脫除不徹底。通過此法得到的精制品，據報道純度達不到99.5％以上，且顏色發黃，白度在90左右，影響在醫藥上的推廣應用。

工業色譜是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，采用高壓輸液系統，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內各成分被分離，實現產品的純化。

發明內容

為了克服現有技術的不足，解決傳統冰醋酸結晶法制得的N-乙酰神經氨酸產品純度達不到99.5％以上、顏色發黃的技術問題，本發明提供一種高純度N-乙酰神經氨酸固體的制備工藝。

本發明的設計構思為：采用工業色譜法結合改進的結晶工藝制備N-乙酰神經氨酸。

目前用色譜法只是對唾液酸進行檢測，流動相通常使用乙腈、甲醇等物質，本發明通過對色譜法進行創造性改進，把流動相改為pH＝3的乙酸或者磷酸溶液，1.減少了廢溶劑的排放，客服了現有色譜的缺點，適合工業化。2.避免了N-乙酰神經氨酸在后續生產過程中顏色加深的問題，利于得到高白度的N-乙酰神經氨酸。3.與唾液酸的結晶溶劑一致，避免了引入新的雜質。

如果只用色譜分離，而沒有后續的連續結晶工藝，也無法得到高純度高白度的N-乙酰神經氨酸的固體。故本發明采用工業色譜和改進結晶相結合的辦法。

改進的結晶工藝主要有：濃縮前用食品級氫氧化鈉對收集的餾分進行調pH值，調pH的原因是增強唾液酸的穩定性，避免在濃縮的過程中顏色加深導致后續酸洗的難度；第一次溶劑洗滌每加入500升的乙酸加入2升的純化水，洗滌溶劑中加入純化水是為了能洗去少量溶于純化水中的雜質，進一步提高結晶的純度，這都是制備高純度高白度的必要技術特征。

本發明通過以下技術方案予以實現。

一種高純度N-乙酰神經氨酸固體的制備工藝，包括以下步驟：

S1、將N-乙酰神經氨酸水解后進行脫色處理，然后對脫色處理后的N-乙酰神經氨酸進行工業色譜分離，采用色譜儀收集餾分4.5-6.5min的餾分，去除N-乙酰神經氨酸中的雜質分，制得N-乙酰神經氨酸粗品溶液；

所述工業色譜分離的條件如下：

色譜柱：TYS，10um，4.6*250mm，填料3g，

流動相：100％乙酸或者磷酸水溶液，流動相的pH值為3.0；

流速：0.6mL/min；

柱溫：室溫；

檢測波長：210nm；

進樣量：200uL/20mg；