[發明專利]一種母乳α-淀粉酶活性檢測方法在審
| 申請號： | 202010619456.1 | 申請日： | 2020-06-30 |
| 公開（公告）號： | CN111676268A | 公開（公告）日： | 2020-09-18 |
| 發明（設計）人： | 李達;康學軍 | 申請（專利權）人： | 李達 |
| 主分類號： | C12Q1/40 | 分類號： | C12Q1/40;G01N21/31;G01N21/78 |
| 代理公司： | 江蘇圣典律師事務所 32237 | 代理人： | 肖明芳 |
| 地址： | 210096*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 母乳 淀粉酶 活性 檢測 方法 | ||
1.一種母乳α-淀粉酶活性檢測方法，其特征在于，包括如下步驟：將新鮮母乳樣本與飽和硫酸銨溶液混合，充分震蕩搖勻后，離心取清液，然后運用碘-淀粉比色法實現母乳α-淀粉酶活性測定。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，新鮮母乳與飽和硫酸銨溶液的體積比為1:1～1:5。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，震蕩條件為：渦旋儀上震蕩1～5min。
4.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，離心條件為離心2～10min，設定轉速為2000～10000r/min。
5.根據權利要求1所述的方法，其特征在于，包括如下步驟：
(1)吸取1ml新鮮母乳于4ml規格塑料試管中，再加入1ml飽和硫酸銨溶液；
(2)將該塑料試管放于渦旋儀上震蕩1min，充分混勻；
(3)將塑料試管放入離心機內離心5min，設定轉速為5000r/min；
(4)取離心后清液100μl于玻璃比色皿中，其中，所述玻璃比色皿中含2ml濃度為0.8mg/ml淀粉溶液；
(5)在避光條件下滴入碘/碘化鉀溶液，反應5～20min；
(6)迅速放入可見分光光度儀中，讀取吸光度值Abs；
(7)將吸光度值Abs代入計算公式求取母乳α-淀粉酶活性值。
6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于，以加入2ml濃度為0.8mg/ml淀粉溶液計，母乳α-淀粉酶活性值AMY的計算公式為(單位U/L)：
其中，代表測定管淀粉的水解程度，大小范圍為0～1，含義為在實驗條件下，100μl離心清液中的淀粉酶在15分鐘內水解0.4mg淀粉，則其活性為800個單位。
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