[發(fā)明專利]一種江西鉛山紅芽芋多倍體包埋誘導(dǎo)的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010613699.4 | 申請日： | 2020-06-30 |
| 公開（公告）號： | CN111642400B | 公開（公告）日： | 2023-02-03 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 尹明華;魏杰;洪森榮 | 申請（專利權(quán)）人： | 上饒師范學(xué)院 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00;A01H1/08 |
| 代理公司： | 北京東方盛凡知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11562 | 代理人： | 謝秀娟 |
| 地址： | 334001 江西*** | 國省代碼： | 江西;36 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 江西 鉛山 紅芽芋 多倍體 包埋 誘導(dǎo) 方法 | ||
1.一種江西鉛山紅芽芋多倍體包埋誘導(dǎo)的方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)取江西鉛山紅芽芋單芽用含有秋水仙素、殼寡糖、石墨烯量子點(diǎn)的MS培養(yǎng)液a浸泡；
(2)步驟(1)經(jīng)過浸泡的江西鉛山紅芽芋單芽用含有秋水仙素、殼寡糖、碳納米管的MS培養(yǎng)液b浸泡；
(3)將步驟(2)經(jīng)過浸泡的江西鉛山紅芽芋單芽與含有海藻酸鈉和蔗糖的無鈣離子改良MS培養(yǎng)液c混合，得混合液；
(4)將步驟(3)混合液滴入含有秋水仙素、殼寡糖、石墨烯量子點(diǎn)、碳納米管、氯化鈣和蔗糖的MS培養(yǎng)液d中進(jìn)行包埋得紅芽芋單芽包埋珠；
(5)將步驟(4)制備的紅芽芋單芽包埋珠接種在MS固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)；
(6)將形態(tài)上發(fā)生明顯變異的紅芽芋單芽從包埋珠中分離出來，并接種至MS固體培養(yǎng)基上，繼代培養(yǎng)3-4次后，即可得到江西鉛山紅芽芋多倍體叢生芽；
(7)當(dāng)步驟(6)多倍體叢生芽長到2-3cm時，將單芽切下來轉(zhuǎn)接至生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到江西鉛山紅芽芋多倍體試管苗；
所述步驟(1)中，MS培養(yǎng)液a中含秋水仙素質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.1％，殼寡糖0.05g/L，石墨烯量子點(diǎn)0.3-0.5g/L，浸泡時間為48h；
所述步驟(2)中，MS培養(yǎng)液b中含有秋水仙素質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.1％、殼寡糖0.05g/L，碳納米管0.3-0.5g/L，浸泡時間為48h；
所述步驟(3)中，無鈣離子改良MS培養(yǎng)液c中海藻酸鈉加入質(zhì)量為溶液體積的3％，蔗糖濃度0.2mol/L；
所述步驟(4)中，MS培養(yǎng)液d含有秋水仙素質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.2％、殼寡糖0.05g/L、石墨烯量子點(diǎn)0.03-0.05g/L、碳納米管0.03-0.05g/L、氯化鈣0.1mol/L、蔗糖0.2mol/L；
所述步驟(5)中，MS固體培養(yǎng)基還含有KT 1mg/L、NAA 0.2mg/L、殼寡糖0.05g/L；培養(yǎng)條件光照時間14h/d，光強(qiáng)1500-2000lx，培養(yǎng)溫度25±2℃，培養(yǎng)時間60天；
所述步驟(6)中，MS固體培養(yǎng)基還含有KT 1mg/L、NAA 0.2mg/L、殼寡糖0.05g/L；培養(yǎng)條件光照時間14h/d，光強(qiáng)1500-2000lx，培養(yǎng)溫度25±2℃；
所述步驟(7)中，生根培養(yǎng)基為1/2MS+0.1-0.5mg/L NAA+0.05g/L殼寡糖；培養(yǎng)條件為：光照時間14h/d，光強(qiáng)1500-2000lx，培養(yǎng)溫度25±2℃。
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