[發明專利]一種通過加強胞內代謝提高甾醇轉化的方法

在審

• 申請號: 202010611959.4
• 申請日: 2020-06-30
• 公開（公告）號: CN111621539A
• 公開（公告）日: 2020-09-04
• 發明（設計）人: 王敏;張揚;申雁冰;周秀玲;駱健美;夏夢雷;張曉
• 申請（專利權）人: 天津科技大學
• 主分類號: C12P33/02
• 分類號: C12P33/02;C12P33/06;C12P33/18;C12P17/06;C12R1/33;C12R1/32
• 代理公司: 北京瑞盛銘杰知識產權代理事務所(普通合伙) 11617
• 代理人: 栗華楠

1.一種甾藥前體的生產方法，其特征在于，所述甾藥前體生產菌株發酵培養基中添加有甘蔗糖蜜和廢菌體水解液。

2.如權利要求1所述的一種甾藥前體的生產方法，其特征在于，所述甘蔗糖蜜的添加量按甘蔗糖蜜中的還原糖在發酵培養基中的含量為2-20g/L進行添加。

3.如權利要求1所述的一種甾藥前體的生產方法，其特征在于，所述廢菌體水解液是將上輪次新金分枝桿菌以植物甾醇為底物生產雄甾-4-烯-3,17-二酮發酵結束后的發酵液離心收集菌體，用水洗滌后，調節菌體濃度為20-200g/L，用NaOH調節pH至6.8后煮沸10-30分鐘即為菌體水解液。

4.如權利要求1所述的一種甾藥前體的生產方法，其特征在于，培養基中菌體水解液的添加量為20-100％。

5.如權利要求1所述的甾藥前體的生產方法，其特征在于，所述的甾藥前體，包括雄甾-4-烯-3,17-二酮、9α-羥基雄甾-4-烯-3,17-二酮、雄甾-1,4-二烯-3,17-二酮和A環降解物。

6.如權利要求1所述的甾藥前體的生產方法，其特征在于，所述發酵培養基組成：K₂HPO₄0.1-3g/L，MgSO₄ 0.1-3g/L，檸檬酸鐵銨0.01-0.2g/L，檸檬酸1-5g/L，磷酸氫二銨1-10g/L，植物甾醇1-50g/L，環糊精1-30mM，其余為水，pH 6.0-7.5。

7.如權利要求1-6任意一項所述的甾藥前體的生產方法，其特征在于，具體如下：將甾體藥物前體生產菌株的種子液按2-10％的接種量轉接于發酵培養基中，發酵培養基中添加2-40％甘蔗糖蜜和20-100％的廢菌體水解液，在25-35℃，50-200rpm條件下培養24-168h。

8.如權利要求1所述的甾藥前體的生產方法，其特征在于，生產菌株為新金分枝桿菌(Mycobacterium sp.)MNR M3。

9.如權利要求1所述的甾藥前體的生產方法，其特征在于，生產菌株為偶發分枝桿菌(Mycobacterium fortuitum)ARL-91。