[發(fā)明專利]一種砂梨組培苗無菌培養(yǎng)方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010610525.2
• 申請日: 2020-06-30
• 公開（公告）號(hào): CN111758568A
• 公開（公告）日: 2020-10-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 涂俊凡;秦仲麒;李先明;伍濤;楊夫臣;朱紅艷;劉政;楊立;程寅勝;聶顯雙
• 申請（專利權(quán)）人: 湖北省農(nóng)業(yè)科學(xué)院果樹茶葉研究所
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00;A01G17/00;A01G2/10;A01G24/10;A01G24/28;A01G24/15
• 代理公司: 重慶市信立達(dá)專利代理事務(wù)所(普通合伙) 50230
• 代理人: 陳炳萍

1.一種砂梨組培苗無菌培養(yǎng)方法，其特征在于：該方法包括以下步驟：

步驟一：基質(zhì)的制備：基質(zhì)的組分為園土、草炭、珍珠巖，基質(zhì)進(jìn)行消毒，晾后備用；裝入塑料盆中；

步驟二：材料的獲得：落葉后萌芽前將大田繁育的1年生砂梨苗，在苗中上部飽滿芽處短截，移栽入裝有消過毒的基質(zhì)的塑料盆中；

步驟三：植株溫室生長條件：全光照，噴霧保持基質(zhì)水分；

步驟四：試驗(yàn)材料處理：將半木質(zhì)化的帶芽莖段切成一定長度的莖段，每個(gè)莖段帶一定數(shù)量的腋芽，保留少量葉柄，用洗潔精清洗，再用流水沖洗；

步驟五：試驗(yàn)材料消毒：將流水沖洗之后的砂梨半木質(zhì)化的帶芽莖段用酒精浸泡，無菌水沖洗，再用升汞消毒，最后無菌水沖洗；

步驟六：初代誘導(dǎo)：將消毒好的莖段剪除兩端后剪成單芽莖段，接種到MS+1.0～2.0mg/L6-BA+0.1～0.2mg/LIBA的培養(yǎng)基中誘導(dǎo)腋芽，暗培養(yǎng)后轉(zhuǎn)到光照條件下培養(yǎng)；

步驟七：增殖培養(yǎng)：初代誘導(dǎo)得到的健壯腋芽切下接種到MS+1.0～3.0mg/L6-BA+0.1～0.3mg/LIBA的培養(yǎng)基中進(jìn)行腋芽的增殖培養(yǎng)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種砂梨組培苗無菌培養(yǎng)方法，其特征在于：所述的步驟一中園土：草炭：珍珠巖2:2:1，基質(zhì)通過多菌靈消毒，晾干時(shí)間為25d～30d，塑料盆規(guī)格為高45cm～50cm，直徑55cm～60cm。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種砂梨組培苗無菌培養(yǎng)方法，其特征在于：所述的步驟四中切后莖段長度為5cm～8cm，腋芽個(gè)數(shù)為2個(gè)～3個(gè)，清洗1遍～2遍，沖洗時(shí)間至少1h。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種砂梨組培苗無菌培養(yǎng)方法，其特征在于：所述的步驟五中酒精濃度為70％，浸泡時(shí)間為30s，升汞濃度為0.1％，消毒時(shí)間為8min～10min，兩次無菌水沖洗的次數(shù)均為3次。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種砂梨組培苗無菌培養(yǎng)方法，其特征在于：所述的步驟六中暗培養(yǎng)的時(shí)間為2d～3d。