[發明專利]一種茶葉中20種揮發性組分的檢測方法

在審

• 申請號: 202010607588.2
• 申請日: 2020-06-29
• 公開（公告）號: CN111879867A
• 公開（公告）日: 2020-11-03
• 發明（設計）人: 毛靜春;譚文涵;滿紅平;伍旭東;呂生;羅正剛
• 申請（專利權）人: 普洱市質量技術監督綜合檢測中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
• 代理公司: 昆明今威專利商標代理有限公司 53115
• 代理人: 賽曉剛

1.一種茶葉中20種揮發性組分的檢測方法，其特征在于，所述茶葉中20種揮發性組分的檢測方法依次包括以下步驟：

S1.根據20種揮發性組分標準品的純度和在溶劑中的溶解性配制1000μg/mL的單標儲備液，然后再配制成混合標準儲備液，最后配制成一系列濃度范圍的20種揮發性化合物混合標準品工作液；

S2.將步驟S1中制得的系列混合標準品工作液經氣相色譜-質譜聯用儀檢測；

S3.以步驟S2中系列標準品的檢測結果建立20種揮發性組分定量標準曲線；

S4.樣品取得：所用茶葉樣品為普洱大葉種紅茶、生茶和熟茶，樣品在粉碎機中分別粉碎后待用；

S5.將步驟S4中制得的茶葉粉末按照水蒸氣蒸餾法富集茶葉中20種揮發性組分得到待測揮發性組分萃取物；

S6.將步驟S5中茶葉待測揮發性組分萃取物經氣相色譜-質譜聯用儀檢測進行檢測；

S7.將步驟S6獲取的茶葉揮發性組分測定結果與標準品進行參數對比進行定性，比對參數為保留時間、特征碎片離子和各碎片離子間的比值參數；

S8.將步驟S3獲得的標準曲線用于S6測定的茶葉揮發性組分的定量，獲得茶葉揮發性組分的定量結果。

2.根據權利要求1所述的揮發性組分的檢測方法，其特征在于，

S1步驟的具體操作為：首先以甲醇、正己烷和丙酮為溶劑，根據各揮發性組分標準品的純度和在溶劑中的溶解性準確配制1000μg/mL的單標儲備液，然后以正己烷為溶劑根據各揮發性組分在儀器上的響應值配制混合標準儲備液；配制系列混合標準工作液其濃度為0.1、0.5、2、4、8、10μg/mL；

步驟S2中氣相色譜-質譜聯用中氣相色譜柱為安捷倫HP-5MS非極性色譜柱，固定相為5％苯基-95％甲基聚硅氧烷，規格為30m×0.25mm×0.25μm；

步驟S3中建立所述標準曲線的方式為，所述標準曲線的橫坐標為：茶葉中20種揮發性組分系列標準品濃度值，所述標準曲線的縱坐標為：20種揮發性組分標準品峰面積值；

S5步驟的具體操作為：準確稱取20g茶葉粉末置于1000mL圓低燒瓶中，加入500mL煮沸的超純水和兩滴硅油。將體系置于電熱套中，連結冷凝裝置；電熱套升溫控制：40℃保持3min，60℃保持2min，70℃燒瓶內液體平穩沸騰，開始計時收集30min冷凝液；以50mL正己烷與三氯甲烷混合液萃取冷凝液中揮發性組分，棄水相保留有機相；有機相中加入適量無水硫酸鈉去除水分，除水后的組分在旋轉蒸發儀上35℃水浴140mbr下濃縮至2mL，濃縮液在常溫條件下用平緩氮氣流吹至凈干，用1mL正己烷定容并過0.45μm有機濾膜,制成茶葉樣品萃取物；

步驟S7中的定性方法為：

1)保留時間識別:樣品組分與標準品組分保留時間偏差不超過5％；

2)質譜碎片離子確認：標準品中確定的特征碎片離子在樣品組分中均有出峰；

3)質譜碎片離子間相對離子豐度的最大允許偏差確認；

步驟S8中的定量方法為：

以系列混合標準工作液測定結果建立組分峰面積與濃度的一元線性方程標準曲線，樣品組分峰面積帶入標準曲線方程即得到樣品各揮發性組分定量結果。

3.根據權利要求2所述的揮發性組分的檢測方法，其特征在于，水蒸氣蒸餾萃取方法中，揮發性組分提取體系加入兩滴硅油，在70℃電熱套中加熱，從微沸開始計時收集揮發性組分30min，茶水比為1:25。

4.根據權利要求2所述的揮發性組分的檢測方法，其特征在于，采用50mL混合萃取液分批多次少量萃取提取物，每次萃取25mL冷凝液。

5.根據權利要求2所述的揮發性組分的檢測方法，其特征在于，色譜-質譜聯用中，色譜的升溫程序為：采用程序升溫，柱溫以3℃/min速率升溫至120℃保持3min，再以5℃/min的升溫速率升至260℃保持10min。

6.根據權利要求2所述的揮發性組分的檢測方法，其特征在于，氣相色譜-質譜聯用的進樣口溫度為220℃；分流進樣，分流比為1:10；載氣為高純氦氣，流速為1.1mL/min。