[發明專利]一種肝細胞體外共培養體系及其構建方法與應用在審
| 申請號： | 202010601331.6 | 申請日： | 2020-06-28 |
| 公開（公告）號： | CN111808795A | 公開（公告）日： | 2020-10-23 |
| 發明（設計）人： | 高博韜 | 申請（專利權）人： | 廣東省醫療器械研究所 |
| 主分類號： | C12N5/071 | 分類號： | C12N5/071;C12Q1/02 |
| 代理公司： | 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205 | 代理人： | 胡輝 |
| 地址： | 510500 廣東省*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 肝細胞 體外 培養 體系 及其 構建 方法 應用 | ||
1.一種肝細胞體外共培養體系，其特征在于：包括細胞外基質、肝細胞以及3T3-J2成纖維細胞；所述的肝細胞種于所述的細胞外基質上，所述的肝細胞表面鋪有所述的3T3-J2成纖維細胞。
2.根據權利要求1所述的肝細胞體外共培養體系，其特征在于：所述的3T3-J2成纖維細胞為3T3-J2成纖維細胞薄片。
3.根據權利要求2所述的肝細胞體外共培養體系，其特征在于：所述的3T3-J2成纖維細胞薄片通過如下步驟得到：將3T3-J2成纖維細胞接種在溫度敏感性培養皿上，培養，剝離，得到3T3-J2成纖維細胞薄片。
4.根據權利要求3所述的肝細胞體外共培養體系，其特征在于：所述的培養依次包括第一次培養和第二次培養；
所述的第一次培養的條件為35～39℃、3％～7％CO2濃度下培養3～5天。
5.根據權利要求4所述的肝細胞體外共培養體系，其特征在于：
所述的第二次培養的條件為18～22℃下培養0.5～2.5h。
6.根據權利要求1所述的肝細胞體外共培養體系，其特征在于：
所述的細胞外基質包括膠原、基質膠在內的所有天然類及合成類的細胞外基質；優選為膠原蛋白；更優選為鼠尾腱Ⅰ型膠原蛋白。
7.根據權利要求1～6中任一項所述的肝細胞體外共培養體系，其特征在于：
所述的肝細胞優選為永生化細胞系、原代細胞、衍生自多能干細胞中的至少一種；更優選為原代細胞；
優選地，所述的肝細胞的來源為人。
8.權利要求1～7中任一項所述的肝細胞體外共培養體系的構建方法，其特征在于：將肝細胞懸液接種于細胞外基質層上，培養；然后，將3T3-J2成纖維細胞薄片鋪在肝細胞上，得到肝細胞體外共培養體系。
9.一種試劑盒，包括權利要求1～7中任一項所述的肝細胞體外共培養體系。
10.權利要求1～7中任一項所述的肝細胞體外共培養體系或權利要求9所述的試劑盒在肝毒性藥物的安全性評測以及肝毒性藥物檢測中的應用。
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