[發明專利]一種亮氨酸脫氫酶突變體及其應用

有效

• 申請號: 202010601081.6
• 申請日: 2020-06-28
• 公開（公告）號: CN111676203B
• 公開（公告）日: 2022-02-01
• 發明（設計）人: 饒志明;徐美娟;陳佳杰;張顯;楊套偉;邵明龍
• 申請（專利權）人: 江南大學
• 主分類號: C12N9/06
• 分類號: C12N9/06;C12N15/53;C12N15/70;C12N1/21;C12P13/04;C12R1/19
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產權代理有限公司 23211
• 代理人: 彭素琴

1.一種亮氨酸脫氫酶突變體，其特征在于，所述亮氨酸脫氫酶突變體與氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的亮氨酸脫氫酶相比，第72位氨基酸由賴氨酸突變為了丙氨酸。

2.如權利要求1所述的一種亮氨酸脫氫酶突變體，其特征在于，編碼所述亮氨酸脫氫酶突變體的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

3.編碼權利要求1所述亮氨酸脫氫酶突變體的基因。

4.攜帶權利要求3所述基因的重組質粒。

5.如權利要求4所述的重組質粒，其特征在于，出發質粒為pET-28a質粒。

6.攜帶權利要求3所述基因或權利要求4或5所述重組質粒的宿主細胞。

7.如權利要求6所述的宿主細胞，其特征在于，所述宿主細胞為細菌或真菌。

8.權利要求1所述的亮氨酸脫氫酶突變體的制備方法，其特征在于，所述方法為，將權利要求6或7所述的宿主細胞的種子液接入到培養基中進行發酵，發酵結束后，收集菌液，離心收集菌體，重懸后破碎菌體，離心收集上清，從上清液中分離得到亮氨酸脫氫酶突變體。

9.權利要求1所述亮氨酸脫氫酶突變體，或權利要求3所述基因，或權利要求4或5所述重組質粒，或權利要求6或7所述宿主細胞，或權利要求8所述制備方法在制備L-2-氨基丁酸或含L-2-氨基丁酸的產品中的應用。

10.一種制備L-2-氨基丁酸的方法，其特征在于，以權利要求1所述亮氨酸脫氫酶突變體，或權利要求6或7所述宿主細胞為催化劑，以2-酮丁酸為底物，催化制備L-2-氨基丁酸。