[發明專利]嘔吐毒素致肉雞小腸機械性損傷模型的建立方法

在審

• 申請號: 202010591398.6
• 申請日: 2020-06-24
• 公開（公告）號: CN111602630A
• 公開（公告）日: 2020-09-01
• 發明（設計）人: 萬雙秀;范瑞文;孫耀貴;李宏全;王弘;葛仕豪
• 申請（專利權）人: 山西農業大學
• 主分類號: A01K67/02
• 分類號: A01K67/02;A23K50/75;A23K10/30;A23K10/18;C12N1/14;C12R1/77
• 代理公司: 北京高沃律師事務所 11569
• 代理人: 董大媛

本發明涉及嘔吐毒素致肉雞小腸機械性損傷模型的建立方法，屬于小腸機械性損傷模型構建技術領域。本發明所述建立方法包括以下步驟：向1日齡肉雞飼喂含10mg/kg嘔吐毒素的全價飼料，飼喂7d后，得到嘔吐毒素致肉雞小腸機械性損傷模型。本發明以嘔吐毒素為誘導劑，成功建立了肉雞小腸機械性損傷的模型，具有操作簡便、結果可靠、重復性好的優點。

技術領域

本發明涉及小腸機械性損傷模型構建技術領域，具體涉及嘔吐毒素致肉雞小腸機械性損傷模型的建立方法。

背景技術

家禽腸道具有雙重功能，既是機體消化和吸收營養物質的重要器官，又是維持機體內環境穩態的先天性防御屏障。家禽的腸道屏障主要包括機械屏障、化學屏障、微生物屏障和免疫屏障，這四種屏障之間相互關聯、共同維護家禽腸道健康。腸道機械屏障又稱物理屏障，是機體防御外源微生物的第一道防線，主要由腸上皮細胞及其緊密連接等組成。閉鎖蛋白(occludin)、閉合蛋白(claudins)和閉合小環蛋白(ZO-1、ZO-2和ZO-3)等是緊密連接的重要組成部分，當腸上皮細胞受到細菌和毒素等的侵擾時，緊密連接可發生移位阻止這些有害物質進入，避免腸道細胞損傷。當腸道機械屏障遭到破壞時，細菌和毒素會侵入腸道細胞引起腸道損傷的發生。

目前有關嘔吐毒素損傷小腸上皮細胞的報道主要集中于細胞，對動物機體小腸損傷研究較少，更沒有一種高效的小腸機械性損傷模型的建立方法。

發明內容

本發明的目的在于提供嘔吐毒素致肉雞小腸機械性損傷模型的建立方法，使嘔吐毒素損傷肉雞模型的構建操作簡便且效果穩定可靠。

本發明提供了一種嘔吐毒素致肉雞小腸機械性損傷模型的建立方法，包括以下步驟：

向1日齡肉雞飼喂含10mg/kg嘔吐毒素的全價飼料，飼喂7d后，得到嘔吐毒素致肉雞小腸機械性損傷模型。

優選的是，所述含10mg/kg嘔吐毒素的全價飼料的制備方法包括以下步驟：

將禾谷鐮刀菌培養物接種至大米中培養，得到嘔吐毒素污染的大米，然后將嘔吐毒素污染的大米制備成含10mg/kg嘔吐毒素的全價飼料。

優選的是，所述大米包括香米。

優選的是，所述培養的溫度為27℃，所述培養的時間為28d。

優選的是，所述禾谷鐮刀菌培養物的制備方法包括以下步驟：

將禾谷鐮刀菌接種至馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基中，27℃培養7d，得到禾谷鐮刀菌固體培養物；

將禾谷鐮刀菌接種至馬鈴薯葡萄糖肉湯培養基中，27℃，180rpm培養7d，得到禾谷鐮刀菌液體培養物。

優選的是，所述接種包括：將禾谷鐮刀菌固體培養物和禾谷鐮刀菌液體培養物同時接種到大米中。

優選的是，所述接種的量為每200g大米接種20～28g禾谷鐮刀菌固體培養物和95～105mL禾谷鐮刀菌液體培養物。

優選的是，建立嘔吐毒素致肉雞小腸機械性損傷模型后，還包括對模型損傷的測定，所述測定的方法包括：測定損傷肉雞小腸的淀粉酶、胰蛋白酶和脂肪酶含量，測定絨毛高度和隱窩深度的比值、小腸的絨毛高度和隱窩深度，測定小腸上皮組織中關鍵緊密連接蛋白ZO-1、Occlaudin和claudin的mRNA表達及其蛋白表達。

本發明還提供了上述技術方案所述建立方法構建得到的嘔吐毒素致肉雞小腸機械性損傷模型在篩選抑制嘔吐毒素的藥物或飼料添加劑中的應用。

本發明還提供了上述技術方案建立方法構建得到的嘔吐毒素致肉雞小腸機械性損傷模型在制備預防或治療腸道疾病的藥物中的應用。