[發明專利]一種提高核酸穩定性的保存液及其應用

在審

• 申請號: 202010587255.8
• 申請日: 2020-06-24
• 公開（公告）號: CN111718927A
• 公開（公告）日: 2020-09-29
• 發明（設計）人: 曹林;聶俊偉;瞿志鵬;張力軍;江明揚;韓錦雄
• 申請（專利權）人: 南京諾唯贊生物科技股份有限公司
• 主分類號: C12N15/10
• 分類號: C12N15/10
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 杜靜;徐冬濤

1.一種提高核酸穩定性的保存液，其特征在于，包括10mM～500mM三羥甲基氨基甲烷(Tris)、1～20mg/ml的非離子表面活性劑、1mM～0.5M EDTA、10mM～500mM無機鹽、0.1～20mg/ml山梨糖醇中的一種或幾種。

2.根據權利要求1所述的保存液，其特征在于，所述的保存液還包括0.1～10mg/ml聚二甲基硅氧烷。

3.根據權利要求1所述的保存液，其特征在于，所述的保存液余量成分為水。

4.根據權利要求1所述的保存液，其特征在于，所述的保存液中的非離子表面活性劑選自Triton X-100、Tween-20、乙基苯基聚乙二醇(NP-40)、洋地黃皂苷、IGEPALCA-630中的一種或多種；無機鹽選自氯化鈉(NaCl)、氯化鉀(KCl)、氯化銨(NH₄Cl)、硫酸鈉(Na₂SO₄)、硫酸鉀(K₂SO₄)、硫酸銨[(NH₄)₂SO₄]中的一種或多種；優選的，無機鹽使用氯化鉀和硫酸銨的組合；更優選的，氯化鉀和硫酸銨的摩爾比為(1～5)：1。

5.根據權利要求1所述的保存液，其特征在于，包括10mM～200mM三羥甲基氨基甲烷(Tris)、1～20mg/ml的非離子表面活性劑、0.1M～0.5M的EDTA、10mM～200mM無機鹽、0.1～20mg/ml山梨糖醇和0.1～10mg/ml聚二甲基硅氧烷中的一種或幾種；優選的，包括10mM～100mM三羥甲基氨基甲烷(Tris)、5～20mg/ml的非離子表面活性劑、0.1M～0.5M的EDTA、10mM～100mM無機鹽、0.5～5mg/ml山梨糖醇和0.5～5mg/ml聚二甲基硅氧烷中的一種或幾種；進一步優選的，包括20mM～80mM三羥甲基氨基甲烷(Tris)、5～15mg/ml的非離子表面活性劑、0.1M～0.4M的EDTA、20mM～50mM無機鹽、0.5～2mg/ml山梨糖醇和0.5～2mg/ml聚二甲基硅氧烷中的一種或幾種；最優選的，包括40mM～60mM三羥甲基氨基甲烷(Tris)、8～12mg/ml的非離子表面活性劑、0.2M～0.3M的EDTA、40mM～50mM無機鹽、0.5～1.5mg/ml山梨糖醇和0.5～1.5mg/ml聚二甲基硅氧烷中的一種或幾種。

6.一種試劑盒，其特征在于，包含權利要求1～5任一項所述的保存液；優選的，所述試劑盒包括或者不包括拭子或/和核酸提取試劑。

7.權利要求1～5任一項所述的保存液在含有核酸的樣品保存中的應用。

8.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，所述的含有核酸的樣品，為含有核酸的包括人以及各種動植物的組織樣品，或為培養細胞、真菌、細菌、病毒樣品；優選的，所述病毒樣品為豬流行性腹瀉病毒或COVID-19。

9.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，將含有核酸的樣品加入保存液中，1～60℃保存；優選為4～56℃；更優選為4～37℃。

10.根據權利要求7所述的應用，其特征在于，含有核酸的樣品與保存液的體積比為1：(3～20)；或者1～100萬細胞量/ml；優選的，含有核酸的樣品與保存液的體積比為1：(3～10)；或者30～70萬細胞量/ml。