[發明專利]兼具藥物控釋及成像功能的介孔氧化硅復合體的制備方法

在審

• 申請號: 202010584377.1
• 申請日: 2020-06-23
• 公開（公告）號: CN111701032A
• 公開（公告）日: 2020-09-25
• 發明（設計）人: 房慧穎;蔣偉
• 申請（專利權）人: 重慶大學附屬腫瘤醫院
• 主分類號: A61K47/69
• 分類號: A61K47/69;A61K49/00;A61K49/08;A61K49/12;A61K49/18;A61K49/22;A61K31/337;A61K41/00;A61K47/60;A61K47/61;A61P35/00;B22F1/00;B22F9/24;B82Y40/00
• 代理公司: 重慶信航知識產權代理有限公司 50218
• 代理人: 穆祥維

1.兼具藥物控釋及成像功能的介孔氧化硅復合體的制備方法，其特征在于，該方法包括如下步驟：

(1)Au/Fe₃O₄@mSiO₂-SH分子探針的制備

首先，Au納米顆粒的制備：將1ml HAuCl₄·4H₂O(1wt％)溶液和2ml檸檬酸三鈉(38.8mM)溶液溶于超純水(90ml)中，磁力攪拌1分鐘；然后緩慢加入1～2mL NaBH4溶液(0.075wt％)，繼續攪拌，直到溶液變成酒紅色，不再變化；經超純水三次洗滌后獲得Au納米顆粒；

其次，制備Au/Fe₃O₄殼核結構納米顆粒：將100mg的氨基修飾的四氧化三鐵(Fe₃O₄-NH₂)納米顆粒分散于100mL純水中，加入1～1.5ml Au納米粒子溶液(10mg/ml)，室溫下攪拌2小時后經磁性分離，用去離子水洗滌三次，加入1～2ml 0.1M的HAuCl₄·4H₂O和10ml 0.2M羥胺水溶液，反應2小時后，將所得納米粒子經磁性分離，用去離子水洗滌三次，即成功制備Au/Fe₃O₄殼核結構納米顆粒；

然后，應用反相微乳液法制備Au/Fe₃O₄@mSiO₂-SH納米顆粒：取0.1g上述制備粒子分散到30mL超純水中，超聲30min，分散均勻后倒入三口燒瓶中，加入50mL水，40mL乙醇，1.5mL氨水，0.2～0.3mL正硅酸四乙酯(TEOS)，攪拌反應10～12h后，然后加入75mg十六烷基三甲基溴化銨(CTAB)，攪拌1h，加入1mL氨水，攪拌10min，混合均勻后，緩慢加入TEOS乙醇溶液，再加入0.01～0.02mL 3-巰丙基三乙氧基硅烷(MPTES)，攪拌反應12h后將產物磁分離，用乙醇洗滌三次以除去多余的TEOS和少量的CTAB；然后在80℃的鹽酸乙醇溶液回流攪拌12h，萃取3次，除去粒子中的模板劑CTAB，即可制備得到Au/Fe₃O₄@mSiO₂-SH納米顆粒；

(2)Au/Fe₃O₄@mSiO₂/DOX-SS-PEG-HA的制備

將30～40mg/mL DOX乙醇溶液或紫杉醇(TAX)乙醇溶液中加入30mgAu/Fe₃O₄@mSiO₂-SH納米顆粒，攪拌2h，同時防止乙醇揮發，攪拌后，離心分離，將所得納米顆粒分散于20％DMSO水溶液，超聲分散30min后，加入25mg SH-PEG-NH₂，反應5h后，離心分離，即可獲得納米粒子Au/Fe₃O₄@mSiO₂/DOX-SS-PEG-NH₂；然后采用碳二亞胺法將50mg的HA溶于PH＝5的2mL MES溶液，加入30mg的EDC和20mg的NHS作為偶聯劑在室溫下活化激活1h，隨后緩慢加入50mg的Au/Fe₃O₄@mSiO₂/DOX-SS-PEG-NH₂，調節PH至8，反應4h后離心，去離子水洗滌三次，即得多功能靶向藥物控釋分子探針Au/Fe₃O₄@mSiO₂/DOX-SS-PEG-HA。

2.如權利要求1所述的一種兼具藥物控釋及成像功能的介孔氧化硅復合體的制備方法，其特征在于，含熒光(FITC)Au/Fe₃O₄@mSiO₂-SH納米顆粒，在加入MPTES時，同時加入0.1-0.2mL3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)-異硫氰酸熒光素(FITC)反應前體。

3.如權利要求1所述的一種兼具藥物控釋及成像功能的介孔氧化硅復合體的制備方法，其特征在于，在步驟(1)中，氨水的質量分數28％。

4.如權利要求1所述的一種兼具藥物控釋及成像功能的介孔氧化硅復合體的制備方法，其特征在于，在步驟(1)中，TEOS乙醇溶液為0.2～0.3ml TEOS分散于20mL乙醇所形成的溶液。