[發明專利]一種MSC體外擴增方法在審
| 申請號： | 202010584282.X | 申請日： | 2020-06-24 |
| 公開（公告）號： | CN111690604A | 公開（公告）日： | 2020-09-22 |
| 發明（設計）人： | 曹哲厚;鄭海剛;韋俊;吳立前 | 申請（專利權）人： | 杭州原生生物科技有限公司 |
| 主分類號： | C12N5/0775 | 分類號： | C12N5/0775 |
| 代理公司： | 杭州橙知果專利代理事務所(特殊普通合伙) 33261 | 代理人： | 賀龍萍 |
| 地址： | 310000 浙江省杭州市蕭山*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 msc 體外 擴增 方法 | ||
1.一種MSC體外擴增方法，其特征在于，包括如下步驟：
S01：將MSPM膜浸潤在水中，制備得到MSPM混合液；將間充質干細胞重懸于第一培養基中，制備得到MSC細胞懸液；
S02：取MSPM混合液，并棄掉上清液，用第二培養基重懸，然后放入培養箱中進行培養，再次棄掉上清液，然后用MSC細胞懸液浸潤MSPM載體，之后補加第一培養基，放入培養箱中進行培養。
2.根據權利要求1所述的一種MSC體外擴增方法，其特征在于，步驟S02中，取MSPM混合液，并棄掉上清液，用第二培養基重懸，重懸液加入孔板中，再放入培養箱中培養，再次棄掉上清液后每孔加入MSC細胞懸液浸潤MSPM載體，之后補加第一培養基，將孔板放入培養箱中進行間充質干細胞的培養。
3.根據權利要求1所述的一種MSC體外擴增方法，其特征在于，步驟S02中，在間充質干細胞培養的第1個小時內，每隔15min拿出孔板進行搖晃混勻，在間充質干細胞培養的第3個小時后，補加第一培養基。
4.根據權利要求1所述的一種MSC體外擴增方法，其特征在于，步驟S02中，在間充質干細胞培養的三天后，吸走每個孔中原有的第一培養液，重新加入新鮮的第一培養液。
5.根據權利要求1所述的一種MSC體外擴增方法，其特征在于，所述的培養箱為二氧化碳含量為5％的CO2培養箱。
6.根據權利要求1所述的一種MSC體外擴增方法，其特征在于，所述的第一培養基為友康無血清培養基；所述的第二培養基為DMEM HG培養基。
7.根據權利要求1所述的一種MSC體外擴增方法，其特征在于，步驟S01中，MSC細胞懸液的密度為1*106cells/mL。
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