[發(fā)明專利]一種耐冬山茶葉片總RNA提取方法在審
| 申請?zhí)枺?/td> | 202010582864.4 | 申請日： | 2020-06-23 |
| 公開（公告）號： | CN111647595A | 公開（公告）日： | 2020-09-11 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 孫迎坤;范夢龍;解豐羽 | 申請（專利權(quán)）人： | 青島農(nóng)業(yè)大學 |
| 主分類號： | C12N15/10 | 分類號： | C12N15/10 |
| 代理公司： | 北京匯捷知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11531 | 代理人： | 馬金華 |
| 地址： | 266109 山*** | 國省代碼： | 山東;37 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 山茶 葉片 rna 提取 方法 | ||
【權(quán)利要求書】：
1.一種耐冬山茶葉片總RNA提取方法，其特征在于按照以下步驟進行：
1、從耐冬山茶植株上剪取革質(zhì)化后的嫩葉，用錫紙包裹放入液氮中速凍，備用，在研缽中加入等體積交聯(lián)聚乙烯基吡咯烷酮，邊加液氮邊快速研磨，盡快使耐冬山茶葉片成粉末狀；
2、取葉片粉末加入裂解液試劑，震蕩機上混勻至無明顯大顆粒物狀態(tài)，靜置裂解，低溫離心；
3、裂解液上清加入等體積的TRIZOL試劑，室溫靜置；
4、加入五分之一體積氯仿，混勻乳化呈乳白色，靜置，離心；
5、抽取上清液至新的RNase-free tube中，加入等體積的乙醇，迅速混勻；將混合液加入RNA吸附柱，離心，倒掉收集管中的廢液；
6、加入乙醇，離心，倒掉廢液；
7、將RNA吸附柱置于一個離心管中，加入RNAfree-H2O，室溫靜置，離心。
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