[發(fā)明專利]一種復(fù)合酶解-發(fā)酵偶聯(lián)的發(fā)酵松花粉提取物的制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202010582286.4
• 申請日: 2020-06-23
• 公開（公告）號: CN111671084A
• 公開（公告）日: 2020-09-18
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉其聳;衣潔菡;徐宏楠
• 申請（專利權(quán)）人: 煙臺新時代健康產(chǎn)業(yè)有限公司
• 主分類號: A23L33/00
• 分類號: A23L33/00;A23L5/20;A23L5/00
• 代理公司: 煙臺上禾知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 37234
• 代理人: 毛毛

本發(fā)明公開了一種復(fù)合酶解?發(fā)酵偶聯(lián)的發(fā)酵松花粉提取物的制備方法，包括如下步驟：(1)、將破壁松花粉與水混合，使用纖維素酶和果膠酶進行酶解處理；(2)、進行發(fā)酵環(huán)境調(diào)節(jié)，并滅菌；(3)、接種菌種，發(fā)酵5?7天；(4)、將步驟(3)獲得的發(fā)酵液分離，得上清液與沉淀；(5)、將步驟(4)獲得的沉淀進行熱回流提取，分離得上清液；(6)、將步驟(4)與步驟(5)獲得的上清液合并，濃縮干燥得發(fā)酵松花粉提取物。本發(fā)明的工藝能顯著提高發(fā)酵松花粉提取物的產(chǎn)率、解決松花粉制品的致敏問題、提高其抗氧化效果。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種復(fù)合酶解-發(fā)酵偶聯(lián)的發(fā)酵松 花粉提取物的制備方法。

背景技術(shù)

現(xiàn)有發(fā)酵松花粉的方法通常是將松花粉破碎后直接在發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵， 比如公開號為CN110037271A，名稱為“一種發(fā)酵松花粉的制備方法”、公開 號為CN109588598A“一種花粉的雙歧桿菌發(fā)酵方法及其發(fā)酵產(chǎn)物的應(yīng)用”、 公開號為CN103141732A“一種利用益生菌進行松花粉發(fā)酵的新工藝”、公開 號為CN109806190A“一種松花粉的發(fā)酵提取工藝”、公開號為CN104938965B “用凝結(jié)芽孢桿菌發(fā)酵的方法及其發(fā)酵產(chǎn)物和應(yīng)用”等的中國專利申請。但 在實際生產(chǎn)中，經(jīng)常遇到由于松花粉破壁后易氧化而貯存時間較短的問題， 或者因為有的人消化松花粉較困難而利用甚少的問題，或者因為過敏而無法 食用松花粉產(chǎn)品的問題，其產(chǎn)品不能令一部分人滿意。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明針對上述現(xiàn)有技術(shù)存在的不足，提供一種復(fù)合酶解-發(fā)酵偶聯(lián)的 發(fā)酵松花粉提取物的制備方法，有效提高了松花粉提取物的提取率，且有效 解決了松花粉或松花粉提取物過敏的問題；此外，本發(fā)明方法還有效提高了 松花粉提取物的抗氧化活性，并有利于黃酮、皂苷的富集。

具體技術(shù)方案如下：

一種復(fù)合酶解-發(fā)酵偶聯(lián)的發(fā)酵松花粉提取物的制備方法，包括如下步 驟：

(1)將破壁松花粉與水混合，使用纖維素酶和果膠酶進行酶解處理；

(2)進行發(fā)酵環(huán)境調(diào)節(jié)，并滅菌；

(3)接種菌種，發(fā)酵5-7天；

(4)將步驟(3)獲得的發(fā)酵液分離，得上清液與沉淀；

(5)將步驟(4)獲得的沉淀進行熱回流提取，分離得上清液；

(6)將步驟(4)與步驟(5)獲得的上清液合并，濃縮干燥得發(fā)酵松花 粉提取物。

松花粉外層存在細胞壁，異常堅硬，耐酸、耐堿且抗生物分解，由于細 胞壁的“保護”作用，無論是直接發(fā)酵還是物理方式破碎后發(fā)酵，都無法使 松花粉內(nèi)的多種化合物充分釋放使之充分發(fā)酵，造成發(fā)酵產(chǎn)品效果不如預(yù)期。 此外，松花粉中的多糖類物質(zhì)異常豐富，單純的發(fā)酵難以使其徹底脫敏。

本發(fā)明在發(fā)酵前使用纖維素酶和果膠酶(具體為酸性纖維素酶和酸性果 膠酶)對松花粉進行了酶解，解決了上述技術(shù)問題，提高了發(fā)酵松花粉提取 物的得率，顯著降低了發(fā)酵松花粉提取物的致敏性，且顯著提高了發(fā)酵松花 粉的抗氧化活性。此外，還降低了發(fā)酵液的黏度，有助于發(fā)酵效率的提升和 產(chǎn)品的分離澄清。

進一步，步驟(1)中，所述的纖維素酶為酸性纖維素酶，所述的果膠酶 為酸性果膠酶。

再進一步，步驟(1)的工作條件為：

破壁松花粉與水的質(zhì)量比為1：(7-12)，酸性纖維素酶與酸性果膠酶 的用量均為以破壁松花粉質(zhì)量計0.08wt％-0.15wt％，調(diào)節(jié)pH至4.8-5.0，50- 55℃酶解1.5-3h。

pH值的調(diào)節(jié)可通過鹽酸或氫氧化鈉實現(xiàn)。

進一步，步驟(2)的工作條件為：