[發明專利]甘草抗氧化活性成分的快速定量篩選方法及其應用

有效

• 申請號: 202010581039.2
• 申請日: 2020-06-23
• 公開（公告）號: CN111751465B
• 公開（公告）日: 2022-01-11
• 發明（設計）人: 周蒙;周倩;戴衍朋;蔣海強;化敏
• 申請（專利權）人: 山東大學第二醫院
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/34;G01N30/72;G01N30/86
• 代理公司: 濟南泉城專利商標事務所 37218
• 代理人: 李桂存

1.一種甘草抗氧化活性成分的快速定量篩選方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）供試品溶液的制備：將干燥的甘草粉碎，過60目篩，加入甲醇，甘草與甲醇的比例為1g：20mL，超聲處理，濾液過0.45 μm微孔濾膜；

（2）Vc對照品溶液的制備：取 L（+）-抗壞血酸標準品，配置儲備液，置4℃冰箱保存，備用；

（3）HPLC-UV-DPPH在線系統：

HPLC系統色譜條件：4.6×250 mm，5μm的 XDB-C₁₈色譜柱，柱溫30 ℃；流動相A為乙腈，流動相B為0.2 %甲酸水溶液，梯度洗脫，檢測器波長為254 nm；

柱后自由基分析系統色譜條件：流動相為DPPH-甲醇溶液，檢測波長517 nm，柱后溫度30 ℃；

（4）質譜條件：流動相采用三通分流；電噴霧正離子模式；全掃描范圍m/z 100～1000；毛細管電壓4000 V；通入干燥氣體，溫度350 ℃；裂解電壓300 V；錐孔電壓65 V，霧化氣壓力30 psi；

（5）得到甘草特征圖譜，得到甘草抗氧化活性成分及各活性成分的抗氧化活性；

結合Vc對照品的峰面積、進樣濃度和DPPH清除率，可同時計算各抗氧化活性成分的DPPH清除率；

所述抗氧化活性為阿佛洛莫生、8-異戊烯基柚皮素、黃羽扇豆魏特酮、半甘草異黃酮B、3′，4′-二甲氧基-3- 羥基-6-甲基黃酮、甘草寧E及甘草寧H；

所述的步驟（3）中梯度洗脫的條件為：0～10 min，流動相A 濃度為15 %～25 %；10～20.3 min，流動相A 濃度為25%～30 %；20.3～70 min，流動相A 濃度為30%～70 %；70～75min，流動相A 濃度為70%～15 %。

2.根據權利要求1所述的快速定量篩選方法，其特征在于，所述的步驟（2）中儲備液的濃度為0.05mg·mL^-1。

3.采用權利要求1所述的快速定量篩選方法評價甘草質量的應用。