[發(fā)明專利]BRD4-PD-1和/或BRD4-PD-L1在制備預(yù)測AML預(yù)后試劑盒中的應(yīng)用

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202010579149.5
• 申請日: 2020-06-23
• 公開（公告）號(hào): CN111621568A
• 公開（公告）日: 2020-09-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李揚(yáng)秋;陳存特;徐玲;高日麗;王順清;張玉平;王彩霞;曾成武
• 申請（專利權(quán)）人: 暨南大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/6886
• 分類號(hào): C12Q1/6886;C12Q1/6851;C12N15/11
• 代理公司: 廣州市華學(xué)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44245
• 代理人: 蘇運(yùn)貞

本發(fā)明提供了BRD4?PD?1和/或BRD4?PD?L1在制備預(yù)測AML預(yù)后試劑盒中的應(yīng)用。是基于本發(fā)明發(fā)明人首次發(fā)現(xiàn)AML患者骨髓中BRD4與PD?1，以及BRD4與PD?L1的表達(dá)情況與AML患者的預(yù)后相關(guān)。當(dāng)BRD4與PD?1，和/或BRD4與PD?L1同時(shí)表達(dá)比例高時(shí)，表明AML患者臨床預(yù)后差的可能性較大。BRD4與PD?1聯(lián)合和/或BRD4與PD?L1聯(lián)合表達(dá)比例對于AML患者的預(yù)后判斷和臨床治療方案的制定具有重要的指導(dǎo)意義，可為AML患者的聯(lián)合應(yīng)用靶向藥物和免疫檢查點(diǎn)抑制劑BRD4?PD?1和BRD4?PD?L1提供更多的臨床預(yù)后研究資料，具有廣闊的應(yīng)用前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域，特別涉及BRD4-PD-1和/或BRD4-PD-L1在制備預(yù)測AML預(yù)后試劑盒中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

免疫逃逸和異常的免疫監(jiān)視在癌癥的發(fā)生和發(fā)展中起著至關(guān)重要的作用。對癌細(xì)胞免疫逃逸中的程序性死亡1(programmed cell death 1，PD-1)和程序性死亡1配體1(programmed cell death 1ligand 1,PD-L1)的研究使其成為近年來最有希望的治療方法之一。最近，PD-1/PD-L1軸阻斷劑已經(jīng)成功用于實(shí)體瘤的臨床試驗(yàn)。此外，應(yīng)用PD-1/PD-L1抑制劑來治療急性髓系白血病(acute myeloid leukemia，AML)患者的多個(gè)臨床試驗(yàn)正在進(jìn)行。我們先前的研究報(bào)道表明，PD-1和PD-L1的高表達(dá)與AML患者的不良臨床預(yù)后有關(guān)。此外，PD-L1的表達(dá)與PD-1/PD-L1阻斷劑治療實(shí)體瘤的較高臨床反應(yīng)密切相關(guān)。這些發(fā)現(xiàn)表明，PD-1/PD-L1阻滯可能是一種針對AML的新型免疫治療策略，但顯然，在AML中，對PD-1/PD-L1阻滯的臨床反應(yīng)相對不同。認(rèn)為仍然存在與PD-1或PD-L1相關(guān)的因素，可能會(huì)加重其免疫抑制作用并影響免疫療法的效果，并導(dǎo)致AML患者的預(yù)后不良。

Bromodomain蛋白4(Bromodomain protein 4,BRD4)是BET家族的成員，在細(xì)胞周期和轉(zhuǎn)錄中起關(guān)鍵作用。BRD4的異常表達(dá)與實(shí)體瘤和白血病的發(fā)病機(jī)制有關(guān)。最近，BRD4已成為血液系統(tǒng)惡性腫瘤(包括AML)的可能治療靶標(biāo)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的首要目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)與不足，提供BRD4-PD-1和/或BRD4-PD-L1在制備預(yù)測AML預(yù)后試劑盒中的應(yīng)用。當(dāng)檢測到高表達(dá)的BRD4-PD-1和/或BRD4-PD-L1時(shí)，表明AML患者的預(yù)后不良可能性大，可以作為預(yù)測AML患者預(yù)后評估的指標(biāo)。

本發(fā)明的另一目的在于提供一種預(yù)測AML預(yù)后的試劑盒。

本發(fā)明的目的通過下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：

BRD4-PD-1和/或BRD4-PD-L1在制備預(yù)測AML預(yù)后試劑盒中的應(yīng)用，是基于本發(fā)明的發(fā)明人首次發(fā)現(xiàn)AML患者骨髓中BRD4-PD-1和/或BRD4-PD-L1表達(dá)情況與AML患者的預(yù)后相關(guān)。所述的BRD4-PD-1是指BRD4和PD-1基因聯(lián)合；所述的BRD4-PD-L1是指BRD4和PD-L1基因聯(lián)合。

在所述的應(yīng)用中，通過檢測臨床患者的骨髓中BRD4基因的表達(dá)量，以及PD-1基因和PD-L1基因的其中一種或兩種的表達(dá)量，結(jié)合內(nèi)參基因的表達(dá)量，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，得到基因的表達(dá)水平，從而預(yù)測AML預(yù)后。

所述的內(nèi)參基因優(yōu)選為18SrRNA。

所述的統(tǒng)計(jì)學(xué)分析方法優(yōu)選為ΔΔCT法；表達(dá)水平＝2^(-ΔΔCT)，ΔΔCT＝ΔCT_臨床患者–ΔCT_正常人，ΔCT_臨床患者＝(CT_基因-CT_內(nèi)參)，ΔCT_正常人＝(CT_基因-CT_內(nèi)參)，CT_基因和CT_內(nèi)參通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測得到。