[發(fā)明專利]BRD4-PD-1和/或BRD4-PD-L1在制備預測AML預后試劑盒中的應用

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• 申請日: 2020-06-23
• 公開（公告）號: CN111621568A
• 公開（公告）日: 2020-09-04
• 發(fā)明（設計）人: 李揚秋;陳存特;徐玲;高日麗;王順清;張玉平;王彩霞;曾成武
• 申請（專利權）人: 暨南大學
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12Q1/6851;C12N15/11
• 代理公司: 廣州市華學知識產(chǎn)權代理有限公司 44245
• 代理人: 蘇運貞

1.BRD4-PD-1和/或BRD4-PD-L1在制備預測AML預后試劑盒中的應用。

2.根據(jù)權利要求1所述的BRD4-PD-1和/或BRD4-PD-L1在制備預測AML預后試劑盒中的應用，其特征在于：通過檢測臨床患者的骨髓中PD-1和PD-L1中的一種或兩種的表達量，以及BRD4基因的表達量，結合內參基因的表達量，進行統(tǒng)計學分析，得到基因的表達水平，從而預測AML預后。

3.根據(jù)權利要求2所述的BRD4-PD-1和/或BRD4-PD-L1在制備預測AML預后試劑盒中的應用，其特征在于：所述的內參基因為18SrRNA；所述的統(tǒng)計學分析方法為ΔΔCT法；表達水平＝2^(-ΔΔCT)，ΔΔCT＝ΔCT_臨床患者–ΔCT_正常人，ΔCT_臨床患者＝(CT_基因-CT_內參)，ΔCT_正常人＝(CT_基因-CT_內參)；CT_基因和CT_內參通過實時熒光定量PCR方法檢測得到；所述的預測具體指：

①當BRD4的表達水平≥0.496和PD-1的表達水平≥1.129時，和/或當BRD4的表達水平≥0.496和PD-L1的表達水平≥0.382時，AML患者臨床預后差的可能性較大；

②當BRD4的表達水平≥0.496或PD-1的表達水平≥1.129時，和/或當BRD4的表達水平≥0.496或PD-L1的表達水平≥0.382時，AML患者臨床預后差的可能性相對較大；

③當BRD4的表達水平0.496和PD-1的表達水平1.129時，和/或當BRD4的表達水平0.496和PD-L1的表達水平0.382時，AML患者臨床預后好的可能性較大。

4.一種預測AML預后的試劑盒，其特征在于：包括用于擴增PD-1cDNA的引物和用于擴增PD-L1 cDNA的引物中的一種或兩種，和用于擴增BRD4 cDNA的引物。

5.根據(jù)權利要求4所述的預測AML預后的試劑盒，其特征在于：

所述的用于擴增PD-1cDNA的引物如下：

PD-1(F):5'-CTCAGGGTGACAGAGAGAAG-3'；

PD-1(R):5'-GACACCAACCACCAGGGTTT-3'；

所述的用于擴增PD-L1 cDNA的引物如下：

PD-L1(F):5'-TATGGTGGTGCCGACTACAA-3'；

PD-L1(R):5'-TGCTTGTCCAGATGACTTCG-3'；

所述的用于擴增BRD4 cDNA的引物如下：

BRD4(F):5'-AGGCAAAAGGAAGAGGACG-3'；

BRD4(R):5'-CGATGCTTGAGTTGTGTTTGG-3'。

6.根據(jù)權利要求5所述的預測AML預后的試劑盒，其特征在于：所述的試劑盒還包括用于擴增內參的引物，具體如下:

18SrRNA(F):5'-CGGCGGCTTTGGTGACTCTAGA-3'；

18SrRNA(R):5'-CCTGCTGCCTTCCTTGGATGTG-3'。

7.根據(jù)權利要求5或6所述的預測AML預后的試劑盒，其特征在于：所述的試劑盒還包括用于分離骨髓單個核細胞的試劑、用于總RNA提取的試劑、用于逆轉錄PCR的試劑、用于實時定量PCR的試劑中的任意一種或至少兩種。

8.權利要求4～7任一項所述的預測AML預后的試劑盒在非診斷檢測BRD4-PD-1和/或BRD4-PD-L1表達中應用。