[發明專利]一種體外培育牛黃及其制備方法

在審

• 申請號: 202010577790.5
• 申請日: 2020-06-22
• 公開（公告）號: CN111658671A
• 公開（公告）日: 2020-09-15
• 發明（設計）人: 羅張龍;蔡紅嬌;徐冬平;石則勇
• 申請（專利權）人: 武漢健民大鵬藥業有限公司
• 主分類號: A61K35/413
• 分類號: A61K35/413;A61K31/575
• 代理公司: 武漢科皓知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 42222
• 代理人: 彭勁松

本發明公開了一種體外培育牛黃及其制備方法。以新鮮的牛膽汁為原料，利用現代分離技術獲得高純度的結合膽汁酸（?；悄懰帷⒏拾蹦懰帷⑴；侨パ跄懰?，甘氨去氧膽酸）。通過對工業化的體外培育牛黃工藝進行技術提升，在培育環節加入高純度的結合膽汁酸，最終制得的體外培育牛黃成品不僅符合質量標準，而且結合膽汁酸總含量在4%以上，質量穩定，與優質天然牛黃基本一致。

技術領域

本發明屬于體外培育牛黃技術領域，具體涉及利用現代分離技術方法獲得結合膽汁酸并用于生產體外培育牛黃的工藝方法及由此方法獲得的體外培育牛黃。

背景技術

牛黃即牛膽結石，膽汁酸是其多種有效成分中的一類，膽汁酸分為結合膽汁酸和游離膽汁酸，其中結合膽汁酸如?；悄懰?、甘氨膽酸、?；侨パ跄懰帷⒏拾比パ跄懰嵊锌咕?、消炎等藥理作用，其含量高低是區別優質或劣質牛黃的重要指標之一。

天然牛黃是自然形成的產物，質量難免存在差異，其結合膽汁酸的含量也有較大的差異，優質的天然牛黃總結合膽汁酸含量大多在3～7％，如優質的澳洲牛黃(結合膽汁酸含量見表1)。但優質牛黃來源有限，且價格昂貴。

表1：優質澳洲牛黃主要結合膽汁酸含量統計表

現有的體外培育牛黃生產工藝是以牛膽汁為原料，經過細菌發酵后，加入一定量的氫氧化鈣、膽紅素、膽酸等物質，根據天然牛黃形成機制，運用生物化學、物理化學、流體力學等技術手段，在模擬膽囊內進行培育，通過工業化設備生產而成?，F有技術生產的體外培育牛黃，其質量指標與優質天然牛黃相近，其安全性和有效性經過了國家有關部門的認可，2004年國家藥品監督管理部門下發文件，同意體外培育牛黃可以等同替代天然牛黃(國食藥監注[2004]21號)，緩解了天然牛黃資源緊缺的局面，保障了一些傳統名方名藥的生產，是中醫藥傳承與創新的典范。然而，一方面，由于牛膽汁來源的不同，牛膽汁中的結合膽汁酸含量有較大差異，能夠滿足體外培育牛黃工藝要求的牛膽汁有限，牛膽汁資源不能得到充分利用。另一方面，要使成品的差異控制在合理范圍內，導致工業化生產過程的控制環節較多，控制流程比較繁瑣。隨著體外培育牛黃應用范圍不斷擴展，市場需求日益增長，需要一種新方法，能夠更充分的利用不同來源牛膽汁中的結合膽汁酸，并應用到體外培育牛黃的工業化生產中，使生產控制過程更為優化，產品的批次間差異更小。

發明內容

本發明目的是提供一種體外培育牛黃的新方法，從牛膽汁中提取高純度的結合膽汁酸，并對原有體外培育牛黃的生產工藝進行技術提升，在培育環節加入高純度的結合膽汁酸和助懸劑，使得最終成品總結合膽汁酸含量在4％以上，含量穩定，與優質天然牛黃基本一致，是優質天然牛黃的理想代用品。

為了實現上述目的，本發明采用如下技術方案：

第一方面，提供一種體外培育牛黃的方法，包含以下步驟：

1)結合膽汁酸的制備：所述結合膽汁酸為?；悄懰?、甘氨膽酸、牛磺去氧膽酸、甘氨去氧膽酸；以牛膽汁為原料進行以下處理：

①黏多糖的去除：每升牛膽汁中加入100ml 0.02％的CTAB溶液，攪拌5min，靜置30min，過濾去除沉淀，得濾液；

②蛋白質的去除：用氫氧化鈉將步驟①的濾液pH調至10～10.5，向每升濾液中加入適量的0.02％的硫酸鋅或氯化鋅溶液，適量的0.01％的氯化鈣或硝酸鈣溶液形成金屬鹽類復合物，過濾去除沉淀，得濾液；

③結合膽汁酸混合物的獲?。河脻恹}酸將步驟②中濾液pH調至1～2，攪拌2min，靜置20min，離心收集沉淀物；