[發明專利]多種植物提取物與多種益生菌分時發酵培養方法

在審

• 申請號: 202010577629.8
• 申請日: 2020-06-23
• 公開（公告）號: CN113832045A
• 公開（公告）日: 2021-12-24
• 發明（設計）人: 徐青
• 申請（專利權）人: 點斗基因科技（南京）有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/38;C12R1/23;C12R1/245;C12R1/25;C12R1/225;C12R1/01
• 代理公司: 南京智造力知識產權代理有限公司 32382
• 代理人: 陳佳佳

1.一種多種植物提取物與多種益生菌分時發酵培養方法，其特征在于：具體步驟如下：步驟一：一級種子液制備；步驟二：二級種子液制備；步驟三：發酵培養基制備和發酵；

一級種子液制備的方法如下：

先取蛋白胨10g,磷酸氫二鉀5g,葡萄糖5g,低聚果糖5g,酵母粉3g，氯化鈉3g，加純凈水1000ml，PH值調至7.4±1，按照上述原料配比配制一級種子培養基，以250ml/瓶的規格平均分裝在4只鹽水瓶中，在溫度121℃條件下滅菌30min，滅過菌的培養基冷卻37℃備用，再將一級種子培養基分別接入凍干保存的嗜酸乳桿菌，兩歧雙歧桿菌，干酪乳桿菌，植物乳桿菌，鼠李糖乳桿菌放置37℃恒溫箱厭氧培養24小時，將培養好的一級種子液放在冰箱保存備用；

二級種子液制備的方法如下：

先取葡萄糖50g，酵母粉30g，氯化鈉30g，蛋白胨100g,磷酸氫二鉀50g,低聚果糖50g,加純凈水10000ml，PH值調至7.4±1，按照上述原料配比配制二級種子培養液，在121℃條件下滅菌30min,降溫至37℃備用，在二級種子培養液中分別接入1％一級種子嗜酸乳桿菌，0.5％一級種子兩歧雙歧桿菌，0.5％一級種子干酪乳桿菌，0.5％一級種子植物乳桿菌，0.5％一級種子鼠李糖乳桿菌，放置37℃恒溫箱培養厭氧培養24小時后，PH值分別是4.5-4.3，終止發酵培養，放置冰箱保存備用；

發酵培養基制備和發酵的方法如下：

取下述比例的原料配置發酵培養基：葡萄糖500g,酵母粉300g，氯化鈉300g，蛋白胨1000g,磷酸氫二鉀500g,雙歧糖500g，灰樹花多糖500g,姬松茸多糖500g,香菇多糖500g,靈芝多糖500g,純凈水100L,PH值7.4±1，放置發酵罐中，121℃條件下滅菌30min備用，溫度降至37℃接入二級種子液1％嗜酸乳桿菌發酵培養4-5小時后，處于對數生長期后，PH值6.0±1再接入0.5％二級種子液兩歧雙歧桿菌，0.5％二級種子液干酪乳桿菌，0.5％二級種子液植物乳桿菌，0.5％二級種子液鼠李糖乳桿菌，放置37℃靜止24小時發酵培養，結束PH值降至3.9—4.2，檢測活菌數：嗜酸乳桿菌從1.0～4.0X106CFU/ml提高到1.0～2.5X108CFU/ml，雙歧桿菌從1.3～3.1X108CFU/ml提高到2.0～4.8X1010CFU/ml。

2.根據權利要求1所述的多種植物提取物與多種益生菌分時發酵培養方法，其特征是：所述的灰樹花多糖、姬松茸多糖、香菇多糖和靈芝多糖的含粗多糖≥30％。